黃曲霉毒素B1致雛雞中樞免疫器官細(xì)胞凋亡機(jī)理的研究.pdf

1、黃曲霉毒素B1(Aflatoxin，AFB1)是霉菌的次級(jí)代謝產(chǎn)物，具有很強(qiáng)的免疫毒性和致癌性。已有研究表明，免疫細(xì)胞的過度凋亡是引起免疫抑制的重要原因。本研究選用1日齡科寶健雛156只，隨機(jī)分為2組（對(duì)照組和AFB1組），每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)26只，分別飼以對(duì)照日糧（AFB1＜0.001 mg/kg）和AFB1日糧(AFB1=0.601mg/kg)，試驗(yàn)周期為21 d。以組織病理學(xué)、電鏡技術(shù)、生物化學(xué)法、TUNEL法、流式細(xì)胞術(shù)及熒

2、光定量PCR等方法探究日糧AFB1誘導(dǎo)雛雞胸腺和法氏囊細(xì)胞凋亡的分子機(jī)理。結(jié)果如下：
　　胸腺AFB1組雛雞胸腺臟器指數(shù)降低;組織學(xué)改變?yōu)?皮質(zhì)區(qū)空洞和細(xì)胞核碎片增多，胸腺髓質(zhì)區(qū)淤血;電鏡觀察顯示，淋巴細(xì)胞染色質(zhì)邊集，線粒體腫脹、脊斷裂消失。線粒體膜電位去極化百分比和胸腺細(xì)胞凋亡百分比極顯著升高(p＜0.01)。Bax、Bak-1、Cytc、Apaf-1、caspase-9、caspase-3、FasL、Fas和FADD mRNA

3、表達(dá)水平極顯著或顯著上調(diào)（p＜0.01或p＜0.05），而Bcl-2和Bcl-xL mRNA表達(dá)水平顯著下降(p＜0.01或p＜0.05)。SOD、CAT、GSH-Px和GR活力及其mRNA表達(dá)水平均顯著降低（p＜0.01或p＜0.05），GSH含量降低，脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物MDA含量顯著升高（p＜0.01或p＜0.05）。結(jié)果表明:日糧AFB1可通過活化線粒體和死亡受體途徑引起胸腺細(xì)胞過度凋亡。
　　法氏囊 AFB1組雛雞法氏囊臟器指

4、數(shù)降低;AFB1組雛雞法氏囊淋巴濾泡內(nèi)淋巴細(xì)胞排列疏松，細(xì)胞核碎片增多;電鏡觀察顯示，淋巴細(xì)胞染色質(zhì)邊集，線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腫脹。線粒體膜電位去極化百分比、法氏囊細(xì)胞凋亡百分比顯著升高。凋亡調(diào)控基因Bax、Bak-1、Cyt c、Apaf-1、caspase-9、caspase-3、Grp78/Bip、Grp94和CaM的mRNA表達(dá)顯著上調(diào)（p＜0.01或p＜0.05），Bcl-2和Bcl-xL mRNA表達(dá)水平顯著降低（p＜0.01或p

5、＜0.05）。SOD、CAT、GSH-Px和GR活力及其mRNA表達(dá)水平均顯著降低，GSH含量降低，脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物MDA含量顯著升高（p＜0.01或p＜0.05）。結(jié)果表明:日糧AFB1可通過活化線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡調(diào)控途徑引起雛雞法氏囊細(xì)胞過度凋亡。
　　綜上，本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，雛雞攝食含0.6 mg/kg AFB1的日糧會(huì)導(dǎo)致胸腺和法氏囊細(xì)胞凋亡的上調(diào)，但在凋亡調(diào)控通路的活化上存在差異，兩個(gè)中樞免疫器官均有線粒體途徑的活化，