硒和沸石及其聯(lián)合對(duì)黃曲霉毒素B1暴露肉雞的保護(hù)作用.pdf

1、黃曲霉毒素中毒是畜禽養(yǎng)殖行業(yè)常見(jiàn)的問(wèn)題，動(dòng)物誤食含黃曲霉毒素的飼糧后會(huì)對(duì)生產(chǎn)性能和繁殖性能造成不良影響，且殘留在動(dòng)物肌肉和組織中的毒素能夠進(jìn)一步對(duì)人體產(chǎn)生損害作用。黃曲霉毒素引起機(jī)體損傷的原因之一是它能夠誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生活性氧簇(ROS)，從而對(duì)機(jī)體產(chǎn)生氧化應(yīng)激反應(yīng)，當(dāng)氧化應(yīng)激作用超出機(jī)體所能承受的抗氧化能力時(shí)，便會(huì)造成損傷。沸石作為霉菌毒素吸附劑的應(yīng)用早有研究，且其作用機(jī)制也已明確;硒(Selenium，Se)是機(jī)體必需的營(yíng)養(yǎng)元素，也是一

2、種有效的抗氧化劑，作為許多抗氧化酶和Ⅱ相解毒酶的組成部分，它在抗氧化應(yīng)激反應(yīng)中起了重要作用，Se用于緩解霉菌毒素的研究報(bào)道也有許多，但其作用機(jī)制并不清楚。研究表明，Se缺乏時(shí)會(huì)誘導(dǎo)胞質(zhì)Nrf2解耦連后入核，啟動(dòng)其調(diào)控的下游Ⅱ相酶和抗氧化酶基因的表達(dá)，因而，我推測(cè)Se在黃曲霉毒素B1(AFB1)毒性效應(yīng)緩解過(guò)程可能與Nrf2抗氧化通路相關(guān)。主要研究結(jié)果如下:
　　1.硒和沸石對(duì)AFB1暴露肉雞肝臟氧化損傷的保護(hù)作用
　　為了研

3、究Se和沸石對(duì)AFB1暴露肉雞肝臟氧化損傷的緩解作用。選取1日齡AA肉雞150只，隨機(jī)分為5個(gè)處理組:A.對(duì)照組（基礎(chǔ)飼糧），B.AFB1組（基礎(chǔ)飼糧+100μg/kg AFB1），C.沸石組（基礎(chǔ)飼糧+100μg/kg AFB1+3％沸石），D.Se組(基礎(chǔ)飼糧+100μg/kg AFB1+0.3 mg/kg Se)，E.沸石+Se組(基礎(chǔ)飼糧+100μg/kg AFB1+3％沸石+0.3 mg/kg Se)，試驗(yàn)期為42 d。結(jié)果表

4、明:AFB1組與對(duì)照組相比，肉雞肝臟重顯著降低(P＜0.05)，平均日采食量和料重比有所升高，平均日增重略有降低;血清谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT，P＞0.05)和谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT，P＜0.05)活性升高;肝臟丙二醛(MDA)和過(guò)氧化氫(H2O2)含量顯著升高(P＜0.05)，總超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽(GSH)和谷胱甘肽過(guò)氧物酶(GSH-Px)水平則顯著降低(P＜0.05);肝臟組織病理切片觀察到多處出血位點(diǎn)及肝細(xì)胞壞死和萎縮。

5、Se組與AFB1組相比，肉雞平均采食量和料重比有所降低(P＞0.05)，肝臟重則顯著增加(P＜0.05)，與對(duì)照組無(wú)顯著差異(P＞0.05);血清GOT和GPT活性減弱;肝臟GSH-Px和T-SOD活性顯著升高(P＜0.05)，MDA含量顯著降低(P＜0.05)，三者都恢復(fù)到對(duì)照組水平，H2O2含量有所減低;肝臟損傷得到緩解。與AFB1組相比，沸石組ADFI、ADG、F/G并未得到良好改善，但3％的沸石降低了肉雞的死淘率，顯著增加了肝臟

6、重(P＜0.05);Se與沸石聯(lián)合組ADG、F/G和死淘率得到一定改善(P＞0.05)，肝臟重也顯著增加(P＜0.05);沸石組、沸石+Se組GSH水平并無(wú)改善(P＞0.05)，但沸石+Se組GSH-Px和T-SOD活性顯著升高(P＜0.05)，恢復(fù)到了對(duì)照水平。沸石組和沸石+Se組的GOT、GPT活性得到一定降低(P＞0.05)，但并未恢復(fù)至對(duì)照水平，三組之間差異不顯著;肝臟損傷得到恢復(fù)。由此可見(jiàn)，Se和沸石能夠緩解AFB1引起的肉雞

7、肝臟氧化損傷，增加肉雞抗氧化能力，但Se和沸石聯(lián)系作用效果并不好于單獨(dú)使用時(shí)的效果。
　　2.硒和沸石及其聯(lián)合對(duì)AFB1暴露肉雞睪丸氧化損傷的保護(hù)作用
　　本試驗(yàn)旨在研究Se和沸石對(duì)AFB1暴露肉雞睪丸氧化應(yīng)激反應(yīng)的緩解作用。試驗(yàn)分組同上文。結(jié)果表明:AFB1、Se、沸石及其聯(lián)合對(duì)睪丸重和睪丸器官指數(shù)的影響差異并不顯著(P＞0.05)。飼糧添加AFB1能夠顯著降低CAT、GSH和GSH-Px的酶活性(P＜0.05)，同時(shí)增加

8、H2O2(P＞0.05)和MDA(P＜0.05)含量。與AFB1組相比，沸石組GSH水平恢復(fù)到對(duì)照組水平，沸石組、Se組和沸石+Se組的其他抗氧化指標(biāo)有所改善，但差異并不顯著(P＞0.05)。對(duì)照組睪丸組織正常，AFB1組和沸石組睪丸略有萎縮;組織形態(tài)學(xué)切片結(jié)果顯示，對(duì)照組曲細(xì)精管形態(tài)完好，間質(zhì)細(xì)胞和精原細(xì)胞細(xì)胞清晰，細(xì)胞核位于細(xì)胞中間，AFB1組曲細(xì)精管間的間隙有所增加，但并不明顯，其他各組的睪丸形態(tài)也較為正常。由此可見(jiàn)，Se和沸石能

9、夠緩解AFB1引起的肉雞睪丸氧化應(yīng)激反應(yīng)，從組織形態(tài)學(xué)看出，AFB1對(duì)睪丸并未產(chǎn)生實(shí)質(zhì)性損傷。
　　3.硒對(duì)AFB1暴露肉雞肝臟和睪丸氧化損傷保護(hù)作用的可能機(jī)制
　　本試驗(yàn)旨在研究Se在緩解AFB1毒性效應(yīng)過(guò)程中，肝細(xì)胞和睪丸細(xì)胞內(nèi)Nrf2和caspase-3表達(dá)的變化。選用1日齡AA肉雞90只，隨機(jī)分為3組:基礎(chǔ)飼糧（對(duì)照組），基礎(chǔ)飼糧+100μg/kg AFB1(AFB1組)，基礎(chǔ)飼糧+100μg/kg AFB1+0.3

10、 mg/kg Se（Se組），試驗(yàn)期42 d。結(jié)果表明:免疫組化和蛋白印跡分析發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)錄因子NF-E2相關(guān)因子2(Nrf2)蛋白在肉雞肝臟和睪丸細(xì)胞核內(nèi)表達(dá)顯著增加(P＜0.05)，凋亡因子caspase-3只在AFB1組細(xì)胞的胞核內(nèi)表達(dá)。在100μg/kg AFB1飼糧中加入0.3 mg/kg Se能使肝細(xì)胞胞核Nrf2表達(dá)水平顯著下降(P＜0.05)，Se組也并未發(fā)現(xiàn)caspase-3的入核表達(dá)。由此可見(jiàn)，Se緩解AFB1引起的肉雞肝