重組共表達質粒pIRES-hVEGF-,121-cDNA-hBMP-4在大鼠骨髓間充質干細胞中的表達及對其分化的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：觀察重組共表達質粒LRES-hVEGF121cDNA/hBMP-4轉染大鼠骨髓間充質干細胞（Mesenchymal Stem Cells，MSCs)后的表達及其對大鼠MSCs向成骨細胞分化的影響，為骨缺損的聯(lián)合基因治療奠定基礎。 方法：使用全骨髓培養(yǎng)法分離、培養(yǎng)大鼠MSCs；流式細胞儀檢測MSCs表面標志抗原的表達；重組共表達質粒pLRS-hVEGF121cDNA/hBMP-4經(jīng)酶切鑒定后，在脂質體介導下將其轉入大鼠MSC

2、s，提取總RNA和總蛋白，進行RT-PCR和Westem blot檢測；茜素紅染色檢測轉染后大鼠MSCs的成骨分化能力。 結果：流式細胞儀檢測顯示CD90表達強陽性，CD45表達陰性；重組共表達質粒plRES-hVEGF121cDNA/hBMP-4成功轉染至大鼠MSCs中，并獲得有效轉錄和共表達；轉染后第14天，茜素紅染色陽性。 結論： hVEGF121和hBMP-4在大鼠MSCs中獲有效轉錄和共表達，并能誘導大鼠MSC

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