FGFR-4和TGF-β1蛋白在人甲狀腺乳頭狀癌中的表達(dá)及意義.pdf

1、甲狀腺癌是常見(jiàn)的內(nèi)分泌惡性腫瘤之一，近年來(lái)發(fā)病率增長(zhǎng)較快[1]。研究發(fā)現(xiàn)，甲狀腺癌是遺傳、環(huán)境及個(gè)人行為等多重因素綜合作用的結(jié)果，但其確切的發(fā)病機(jī)制目前還不清楚[2]，因此探討甲狀腺癌的病因和影響其侵襲轉(zhuǎn)移的因素，對(duì)甲狀腺癌的治療，改善患者的預(yù)后具有重要的意義。
　　轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1（TGF-β1）是典型的多功能細(xì)胞因子，對(duì)細(xì)胞增殖分化，血管形成，免疫抑制，細(xì)胞外基質(zhì)和纖維形成，腫瘤發(fā)生都有調(diào)節(jié)作用。其對(duì)細(xì)胞增殖和分化具有雙向調(diào)節(jié)

2、作用，在正常細(xì)胞、腫瘤早期中其具有普遍的抑制作用，而在中晚期腫瘤細(xì)胞中，有助于腫瘤逃避機(jī)體的免疫監(jiān)視進(jìn)而抑制免疫系統(tǒng)對(duì)腫瘤的殺傷作用。成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體4（FGFR-4）屬于受體酪氨酸激酶（receptor tyrosine kinase,PTK）家族的重要成員，其與配體成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（fibroblast growth factor,FGF）相結(jié)合，調(diào)控一大類細(xì)胞的增殖、凋亡、移行和血管生成等過(guò)程。在多種腫瘤細(xì)胞中都存在 FG

3、F/FGFR信號(hào)通路的失調(diào)控，其可通過(guò)促進(jìn)腫瘤血管生成或直接刺激腫瘤生長(zhǎng)而在腫瘤的發(fā)展進(jìn)程中發(fā)揮重要作用。本實(shí)驗(yàn)研究的目的在于探討這兩種因子在甲狀腺乳頭狀癌（PTC）中的表達(dá)情況及其相關(guān)性，并探討其與臨床病理特征的關(guān)系，可以深入了解 PTC的發(fā)生、發(fā)展和預(yù)后，從而指導(dǎo)多靶點(diǎn)抗PTC藥物的研發(fā)。
　　目的：
　　本研究觀察PTC組織中FGFR-4和TGF-β1蛋白的表達(dá)情況，及二者之間是否具有相關(guān)性，及二者與臨床病理特征的關(guān)系

4、。初步闡明二者在PTC發(fā)生發(fā)展、浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移中的可能作用，為PTC的多靶點(diǎn)治療策略提供理論依據(jù)。
　　方法：
　　1、選取甲狀腺乳頭狀癌89例和癌旁正常甲狀腺組織30例，應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)其中FGFR-4和TGF-β1蛋白的表達(dá)情況，并分析二者的相關(guān)性，并結(jié)合PTC的臨床病理特征，分析二者在PTC中的表達(dá)特點(diǎn)及與臨床病理特征的關(guān)系。
　　2、應(yīng)用蛋白印跡法檢測(cè)45例不同分化程度的甲狀腺乳頭狀癌和30例癌旁正常甲狀腺組

5、織中FGFR-4和TGF-β1蛋白的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：
　　1、 FGFR-4蛋白的表達(dá)：FGFR-4陽(yáng)性表達(dá)定位于腫瘤細(xì)胞的胞膜或胞漿，出現(xiàn)棕黃色細(xì)小顆粒，偶爾可見(jiàn)胞核中有陽(yáng)性表達(dá)（Fig.7）。89例甲狀腺乳頭狀癌組織中FGFR-4陽(yáng)性表達(dá)77例，其陽(yáng)性率為86.5％；30例癌旁正常組織中FGFR-4陽(yáng)性表達(dá)4例，陽(yáng)性率為13.3%，其余均呈陰性表達(dá)（Fig.6）。平均積分光密度值統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，F(xiàn)GFR-4在PTC中

6、的表達(dá)與癌周正常組織相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=4.310，P=0.002）（Table2）。
　　2、 TGF-β1蛋白的表達(dá)：TGF-β1陽(yáng)性表達(dá)定位于腫瘤細(xì)胞的胞漿，出現(xiàn)黃色或棕黃色的細(xì)小著色顆粒為陽(yáng)性細(xì)胞（Fig.4）。89例甲狀腺乳頭狀癌組織中TGF-β1陽(yáng)性表達(dá)69例，其陽(yáng)性率為77.5%；30例癌旁正常組織中TGF-β1陽(yáng)性表達(dá)2例，陽(yáng)性率為6%，其余均呈陰性表達(dá)（Fig.3）。平均積分光密度值統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，TGF

7、-β1在PTC中的表達(dá)與癌周正常組織相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=-5.782，P=0.000）（Table1）。
　　3、 FGFR-4與PTC病理參數(shù)資料的關(guān)系： FGFR-4表達(dá)高低與惡性腫瘤的高中低分化、病理分期和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)（P<0.01），而與腫瘤病人的性別、年齡、惡性腫瘤大小無(wú)關(guān)（P>0.05）。存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的PTC患者中FGFR-4蛋白陽(yáng)性表達(dá)率（93.7%）明顯高于無(wú)轉(zhuǎn)移者（76.2%）（P<0.05）；T

8、NM分期較晚患者（III、IV期）FGFR-4蛋白的表達(dá)率（90.2%）明顯高于早期患者（I、II期）（71.8%）（P<0.01）。
　　4、 TGF-β1與PTC病理參數(shù)資料的關(guān)系：TGF-β1表達(dá)高低與惡性腫瘤的高中低分化、病理分期和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)（P<0.01），而與腫瘤病人的性別、年齡、惡性腫瘤大小無(wú)關(guān)（P>0.05）。存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的PTC患者中TGF-β1蛋白陽(yáng)性表達(dá)率（93.6%）明顯高于無(wú)轉(zhuǎn)移者（59.5%）（

9、P<0.05）；TNM分期較晚患者（III、IV期）TGF-β1蛋白的表達(dá)率（97.5%）明顯高于早期患者（I、II期）（79.5%）（P<0.01）。
　　5、 PTC中FGFR-4和TGF-β1蛋白表達(dá)的相關(guān)性：測(cè)量TGF-β1和FGFR-4免疫組織化學(xué)染色的平均分光密度進(jìn)行統(tǒng)計(jì)和相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)，TGF-β1和FGFR-4的平均積分光密度值呈非線性關(guān)系，應(yīng)用 Spearman進(jìn)行相關(guān)性分析檢驗(yàn)其相關(guān)系數(shù) rs=0.327，兩者呈

10、顯著的正相關(guān)（P<0.05），結(jié)果見(jiàn)表4。
　　6、蛋白印跡法結(jié)果：在癌旁正常和不同分化程度的甲狀腺乳頭狀癌組織中，F(xiàn)GFR-4和TGF-β1蛋白在癌組織中(FGFR-4分化較好組2952.77±2.49，分化中間組4037.9±3.05，分化較差組5228.57±1.89；TGF-β1分化較好組2952.77±2.49，分化中間組4037.9±3.05，分化較差組5228.57±1.89)的表達(dá)明顯高于癌旁正常組織(906.8±

11、2.72)，隨著癌組織分化程度的降低，表達(dá)明顯上調(diào)，如表5，檢測(cè)結(jié)果與免疫組化結(jié)果相符。
　　結(jié)論：
　　1、 FGFR-4和TGF-β1蛋白在PTC中的表達(dá)均高于癌旁正常組織中的表達(dá)，提示FGFR-4和TGF-β1蛋白可能與PTC的發(fā)生發(fā)展緊密相關(guān)。
　　2、 FGFR-4和TGF-β1蛋白表達(dá)與腫瘤的分化程度、TNM分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)，而與患者的性別、年齡、腫瘤大小無(wú)關(guān)，提示二者參與了PTC的惡性增殖和侵襲轉(zhuǎn)移，