藥物性糖尿病大鼠學(xué)習(xí)記憶能力及海馬IGF-Ⅰ信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的變化.pdf

1、目的：糖尿病腦病是糖尿病慢性并發(fā)癥之一，以學(xué)習(xí)與記憶障礙為主要特征，逐漸引起人們的重視。在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中，海馬與學(xué)習(xí)記憶功能關(guān)系密切，由此推測，糖尿病腦病的發(fā)病機(jī)制可能是海馬組織結(jié)構(gòu)和功能退行性改變等異常所致。本研究旨在探討持續(xù)高糖狀態(tài)對大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響以及大鼠海馬凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)的變化，為糖尿病腦病的發(fā)病機(jī)制提供相關(guān)依據(jù)。 方法： 1.糖尿病大鼠模型制備：健康雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠(體重20

2、0～250g)12只，隨機(jī)分為兩組：正常對照組6只，糖尿病組6只。糖尿病組系通過一次性腹腔注射鏈脲佐菌素STZ(50mg/kg體重)誘導(dǎo)的實驗性糖尿病大鼠模型，STZ注射3d后測尾靜脈血糖，≥16.7mmol/L者認(rèn)定為DM大鼠。 2．行為學(xué)實驗：各組大鼠于0周、12周分別進(jìn)行Morris水迷宮實驗，記錄逃避潛伏期(s)及游出距離(cm)。 3.病理標(biāo)本制備及觀察指標(biāo)：12周水迷宮實驗后次日，空腹心臟取血測定血糖、糖化血

3、紅蛋白(HbA<,1>c)后，處死大鼠，立即完整取出雙側(cè)海馬。左側(cè)海馬用于組織mRNA含量測定；右側(cè)海馬石蠟包埋，切片用于免疫組織化學(xué)染色。分別觀察IGF-Ⅰ、Akt1、p-Akt及caspase3的表達(dá)情況，并用Imagepro-plus 5.0顯微攝像分析系統(tǒng)對染色程度進(jìn)行光密度半定量分析。 結(jié)果： 1.0周時，DM組和NC組大鼠體質(zhì)量(g)分別為226.3±15.4和228.7±16.1，無明顯差異(P>0.05)

4、；12周時，DM組大鼠體質(zhì)量(g)為265.7±34.7，顯著低于NC組421.7±42.3(P<0.01)。0周時，DM組和NC組大鼠隨機(jī)尾靜脈血糖(mmol/L)分別為4.9±1.1和5.7±1.0，無明顯差異(P>0.05)；12周時，DM組大鼠隨機(jī)尾靜脈血糖為31.6±3.7，顯著高于NC組的4.8±1.1(P<0.01)。12周時，DM組大鼠空腹動脈血糖(ABG)為20.0±7.9，顯著高于NC組的8.8±3.0(P<0.01

5、)：DM組大鼠HbA<,1>c(﹪)為4.1±0.4，顯著高于NC組1.6±0.7(P<0.01)。 2.0周時，DM組與NC組平均逃避潛伏期(S)分別為20.3±13.7和20.8±14.9，游出距離(cm)分別為429.6±297.4和404.9±286.9，無顯著性差異(P>0.05)；12周時，DM組平均逃避潛伏期(s)為8.4±5.1，較NC組(6.5±4.0)延長，但無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，DM組平均游出距離(

6、cm)為214.0±129.2，較NC組(144.0±94.0)明顯延長(P<0.05)。 3.12周時，DM組大鼠海馬CA1區(qū)IGF-Ⅰ mRNA相對表達(dá)量(0.24±0.03)，較NC組(0.31±0.08)明顯降低(P<0.05)；DM組Aktl mRNA相對表達(dá)量(0.99±0.27)，較NC組(1.67±0.27)顯著降低(P<0.01)。 4.12周時，DM組在大鼠海馬CA1區(qū)中IGF-Ⅰ蛋白表達(dá)量(0.17

7、2±0.007)，較NC組(0.20±0.019)顯著降低(P<0.01)：DM組p-Akt蛋白表達(dá)量(0.197±0.021)，與NC組(0.176±0.032)無顯著性差異(P>0.05)；DM組caspase3蛋白表達(dá)量(0.120+0.016)，較NC組(0.100±0.012)明顯增高(P<0.05)。 結(jié)論： 1.12周DM大鼠學(xué)習(xí)記憶能力輕度下降。 2.12周DM大鼠海馬中IGF-Ⅰ表達(dá)下調(diào)，繼而信