腦出血后血腫周圍神經(jīng)細(xì)胞凋亡及其與Caspase-3表達(dá)關(guān)系的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、，I^墮些史亙墮壁旦旦塑絲塑墮塑生星基量￡!!￡!!!：!墨壟差墨盟塞墼盟壅——————————————i!曼摘要爭(zhēng)互59175目的：本實(shí)驗(yàn)通過觀察腦出血后不同時(shí)期血腫周圍神經(jīng)細(xì)胞凋亡情況和Caspase3基因表達(dá)，來探討腦出血后血腫周圍神經(jīng)細(xì)胞損傷的機(jī)制，并探討Caspase3與腦出血后神經(jīng)細(xì)胞凋亡的關(guān)系。方法：在立體定向下采用二次注入法向成年大鼠右尾殼核區(qū)注射自體動(dòng)脈血60ul制成大鼠腦內(nèi)血腫模型，用相同的方法注射等量的無活性石蠟油

2、作為對(duì)照組。于腦出血后4h、6h、1d、3d、5d、10d等不同時(shí)間點(diǎn)斷頭、取腦。采用原位未端標(biāo)記法(TUNEL法)和免疫組化方法進(jìn)行動(dòng)態(tài)形態(tài)學(xué)觀察，了解出血后不同階段血腫周圍神經(jīng)亡和Caspase3蛋白表達(dá)情況。果：自體動(dòng)脈血注入后，大鼠出現(xiàn)左側(cè)肢體偏癱、活動(dòng)減少、向左側(cè)轉(zhuǎn)圈等行為學(xué)改變。大體標(biāo)本觀察可見右尾殼核區(qū)大小、形態(tài)比較一致的血腫。腦出血后4h時(shí)血腫周圍尚無凋亡細(xì)胞出現(xiàn)。6h血腫周圍區(qū)即有凋亡的神經(jīng)細(xì)胞出現(xiàn)，逐漸增多，3天達(dá)高

3、峰之后逐漸下降，lo天仍可見凋亡細(xì)胞。在HE染色中病理改變明顯的部位凋亡細(xì)胞比較集中，無相應(yīng)改變的部位也有凋亡細(xì)胞存在。腦出血后6小時(shí)血腫周圍神經(jīng)細(xì)胞Caspase3蛋白開始表達(dá)，3天達(dá)高峰以后逐漸恢復(fù)。注射石蠟油的對(duì)照組周圍腦組織僅有少量TUNEL陽性細(xì)胞及Caspase3蛋白陽性表達(dá)細(xì)胞，與假手術(shù)組無顯著性差異≯結(jié)論：①立體定向下二次注血法制作的大鼠腦出血模型具有操作簡(jiǎn)單、重復(fù)性好、接近臨床的優(yōu)點(diǎn)。②腦出血后血腫周圍神經(jīng)細(xì)胞損傷有凋

4、亡機(jī)制參與，在出血后6小時(shí)發(fā)生凋亡，第3天達(dá)高峰，提示為減少血腫對(duì)周圍神經(jīng)細(xì)胞損害的程度，血腫清除的時(shí)間窗應(yīng)在出血后6小時(shí)內(nèi)。③Caspase3表達(dá)時(shí)相變化與血腫周圍神經(jīng)細(xì)胞凋亡基本一致，Caspase3表達(dá)增加與血腫周圍神經(jīng)細(xì)胞凋亡有關(guān)。④首次證實(shí)，腦出血后周圍神經(jīng)細(xì)胞的損害在分子學(xué)水平其范圍遠(yuǎn)比肉眼和病理所觀察到的要廣泛。＼／關(guān)鍵詞：腦出血捅亡Caspase3蛋白表達(dá)大鼠墮坐些巫壘壁旦里塑!絲塑墮塑圭墨苧量￡!!貯竺!：!壅墮差墨盟

5、壅絲墅蔓皇呈至!曼皇￡!werefoundintheparaffinoilcontrolbrainsTheCaspase一3proteinbegantoexpressat6hafterhemorrhage，peakedat3days，andthendeclinedgraduallyConclusion：①Themodelofintracerebralhemorrhageinratshastheadvantagesofeasyoperat

6、ion，goodrepetitionandetai②ApoptosisisapatternofneuronalcelldeathafterintracerebralhemorrhageTheapopticalneuronalcellsappearedat6h，andpeakedat3dafterhemorrhageanditdemonstratedthatthetimeofhematomaevacuationshouldbein6hou

7、rs③ThetimephasepatternofCaspase3proteinissimilartothatofneuronalapoptosisCaspase一3proteinplayanimportantroleintheprocessofapoptosisofneuronafterintracerebralhemorrhage④Theinjuryrangofneuronalcellssurroundingtheintracereb