靶向干擾PRMT2基因對甲狀腺癌TPC-1細胞中CCND1的影響及機制研究.pdf

1、目的：研究靶向干擾PRMT2基因對甲狀腺癌TPC-1細胞中CCND1的影響，并對其作用機制進行初步探討。
　　方法：應用Lipofectamine2000將構建的2條PRMT2-miRNA質粒（PRMT2-miRNA1和PRMT2-miRNA2）瞬時轉染TPC-1細胞，采用Western Blot技術，從蛋白水平檢測TPC-1細胞中PRMT2基因表達下調(diào)后細胞p-Akt、p-GSK-3β、CCND1的表達水平。利用雙熒光素酶報告系

2、統(tǒng)，將CCND1基因的啟動子熒光素酶報告質粒與PRMT2-miRNA質粒共轉染TPC-1細胞，檢測PRMT2對CCND1啟動子活性的影響。
　　結果：
　　1.低表達細胞系（PRMT2-miRNA1、PRMT2-miRNA2）和對照組（LacZ-miRNA）相比，低表達細胞系的p-Akt、p-GSK-3β、CCND1蛋白水平均增高，有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。
　　2.在低表達細胞系（PRMT2-miRNA1）中，加

3、入 Akt的抑制劑 Wortmannin、LY294002后與未加入抑制劑相比，p-Akt、p-GSK-3β、CCND1蛋白水平均下降，有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。
　　3.將CCND1啟動子的熒光素酶報告質粒與PRMT2-miRNA質粒共轉染TPC-1細胞時，發(fā)現(xiàn)PRMT2能調(diào)節(jié)CCND1啟動子活性，有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。
　　結論：
　　1.在甲狀腺癌TPC-1細胞中，靶向干擾PRMT2基因可促進CCND