PRMT2在乳腺癌細胞tamoxifen耐藥性中的作用初步研究.pdf

1、目的：研究PRMT2對乳腺癌細胞TAM耐藥產(chǎn)生的影響，并對其機制進行初步探討，為耐藥性乳腺癌的治療提供新思路。
　　方法：以體外培養(yǎng)的MDA-MB-231細胞和MCF-7細胞為研究對象，研究PRMT2在TAM誘導乳腺癌細胞凋亡過程中的作用及其相關(guān)機制。實驗包括3部分（1）通過流式細胞術(shù)，從細胞水平檢測TAM對乳腺癌細胞凋亡的影響；（2）通過激光共聚焦技術(shù)明確 PRMT2及ER-ɑ36的亞細胞定位；（3）利用蛋白質(zhì)免疫印跡法，從蛋白

2、水平分析TAM對乳腺癌細胞PRMT2、ER-ɑ36及P-Akt表達的影響。
　　結(jié)果：1.流式細胞術(shù)結(jié)果顯示：MCF-7細胞株經(jīng)不同濃度TAM處理4小時后，與對照組相比，2μM、5μM、7.5μM藥物處理組細胞的凋亡率明顯增加，且TAM具有劑量依賴性的促細胞凋亡效應，有統(tǒng)計學意義(P<0.001)。然而，在相同藥物濃度作用下，MDA-MB-231細胞的凋亡率要明顯低于MCF-7細胞，說明MDA-MB-231細胞對TAM相對耐藥。<

3、br>　　2.免疫熒光、激光共聚焦結(jié)果顯示：在MDA-MB-231乳腺癌細胞中，PRMT2及ER-ɑ36的亞細胞定位在細胞核及細胞質(zhì)中，表明PRMT2和ER-ɑ36在該細胞系中存在共定位。
　　3. WB結(jié)果顯示，在對TAM相對敏感的MCF-7細胞株中，不同濃度TAM（0μM、2μM、5μM、7.5μM）處理細胞4小時后，P-Akt表達水平明顯下調(diào)，且呈劑量依賴性，而此細胞株中 PRMT2及ER-ɑ36的表達水平無明顯變化；然而，

4、在對 TAM相對耐藥的MDA-MB-231細胞株中，PRMT2的表達水平下調(diào)，伴隨著 ER-ɑ36與P-Akt表達水平明顯上調(diào)，三者變化都具有劑量依賴性特點。進一步利用兩種乳腺癌細胞進行TAM時效研究，結(jié)果與各自TAM量效處理組相一致。
　　結(jié)論：1.PRMT2與ER-α36在乳腺癌MDA-MB-231細胞中存在共定位。
　　2.在MDA-MB-231細胞中，PRMT2可能參與TAM耐藥，機制與TAM下調(diào)PRMT2表達，提高