血管生成素1基因轉染對胃癌細胞侵襲能力的實驗研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：為研究Ang-1對胃癌細胞侵襲能力有無影響，我們以腺病毒為載體，將Ang-1基因轉染至人胃癌細胞BGC-823，研究過表達Ang-1的人胃癌細胞BGC-823中uPA和MMP-2的表達情況，并了解胃癌侵襲能力及可能機制。 方法：利用腺病毒作為載體將已構建成功的含Ang-1基因的重組腺病毒（Ad-Ang-1）瞬時轉染人胃癌細胞BGC-823，轉染編碼綠色熒光蛋白的復制缺陷型腺病毒重組體（Ad-GFP）為平行對照，未轉染的正常

2、細胞為空白對照，采用Transwell小室檢測細胞的侵襲能力；采用RT-PCR檢測三組細胞中MMP-2和uPA在mRNA水平表達的情況；采用Western blot檢測三組細胞中MMP-2和uPA在蛋白水平表達的情況；采用ELISA檢測三組細胞中培養(yǎng)上清和細胞中uPA的含量；采用Millicell小室檢驗細胞的遷移能力。 結果：Millicell小室和Transwell小室結果顯示Ad-Ang-1組細胞的遷移和侵襲能力與其他兩組

3、比較均明顯提高，差異有顯著性，而Ad-GFP組和空白對照組比較差異無顯著性；RT-PCR和Western blot結果顯示MMP-2和uPA在Ad-Ang-1組中mRNA和蛋白水平表達明顯高于Ad-GFP組和空白對照組（P<0．05）；ELISA結果顯示Ad-Ang-1組胃癌細胞培養(yǎng)上清和細胞中uPA蛋白的含量明顯高于Ad-GFP組和空白對照組（P<0．05）。 結論：過表達Ang-1的胃癌細胞遷移和侵襲能力均明顯提高，Ang-

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