人肝癌細(xì)胞系來(lái)源iPS細(xì)胞的研究.pdf

1、誘導(dǎo)多潛能干細(xì)胞(Induced pluripotent stem cells，iPScells)是成體細(xì)胞在外源因子作用下，經(jīng)直接細(xì)胞核程序重整而重新獲取多潛能性的干細(xì)胞。iPS細(xì)胞在應(yīng)用上規(guī)避了倫理和免疫排斥問(wèn)題，其在疾病模型建立與機(jī)理研究、細(xì)胞治療等方面極具應(yīng)用價(jià)值。iPS細(xì)胞在疾病模型研究上已取得重大成果。然而，iPS細(xì)胞的研究面臨重編程效率低和成瘤風(fēng)險(xiǎn)兩大挑戰(zhàn)。
　　 在本課題中，應(yīng)用慢病毒作為載體，攜帶Oct4、So

2、x2、Nanog、Lin28基因重編程人肝癌細(xì)胞系Huh7為多潛能干細(xì)胞樣的細(xì)胞。人肝癌細(xì)胞系Huh7細(xì)胞是可在體外永生化生長(zhǎng)的一種人肝癌細(xì)胞系。在本課題中Huh7細(xì)胞被重編程后，在形態(tài)學(xué)、免疫組織化學(xué)、堿性磷酸酶檢測(cè)以及RT-PCR等方法檢測(cè)其是否具有或部分具有多潛能性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，Huh7細(xì)胞被重編程為多潛能干細(xì)胞樣細(xì)胞，堿性磷酸酶染色呈陽(yáng)性，免疫熒光實(shí)驗(yàn)證明其表達(dá)多潛能因子，Oct4與TRA-1-60，qPCR實(shí)驗(yàn)證明其高水平表