RAGE在人肝癌細(xì)胞系生物學(xué)行為變化中的作用.pdf

1、背景:晚期糖基化受體終產(chǎn)物(Receptor for advanced glycation endproducts，RAGE)是一種在多種腫瘤中高表達(dá)的癌基因，但是它在原發(fā)性肝細(xì)胞癌(hepatocellular carcinoma，HCC)中的作用尚未明確。
　　 方法:通過檢測RAGE在肝癌細(xì)胞系Huh7及HepG2中的表達(dá)，我們發(fā)現(xiàn)RAGE在Huh7中表達(dá)更高，因此選擇Huh7進行下一步研究。我們通過向Huh7細(xì)胞轉(zhuǎn)染入靶

2、向RAGE的特異性siRNA、加入RAGE抗體以及RAGE的配體HMGB1來研究RAGE對肝癌細(xì)胞增殖的影響。
　　 結(jié)果:研究發(fā)現(xiàn)RAGE可以調(diào)控肝癌細(xì)胞的增殖。靶向RAGE的siRNA下調(diào)RAGE的表達(dá)及RAGE特異性抗體可以抑制肝癌細(xì)胞Huh7的增殖，同時，siRNA干擾RAGE的表達(dá)可以阻滯細(xì)胞于G1期，并抑制DNA的合成(p＜0.01);而RAGE的配體，HMGB1可以促進細(xì)胞的增殖，并增加處于S期的細(xì)胞數(shù)目(p＜0.

3、05)。RT-PCR，qRT-PCR和Western Blot的結(jié)果表明，RAGE和HMGB1可以調(diào)節(jié)Huh7中核轉(zhuǎn)錄因子(nuclear factor kappa-light-chain-enhancer ofactivated B cells，NF-κB p65)的表達(dá)。并且，應(yīng)用Hoechst33258染色Huh7細(xì)胞發(fā)現(xiàn)，RAGE特異性抗體可以誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，而HMGB1能抑制細(xì)胞凋亡，RT-PCR的結(jié)果也顯示RAGE特異性抗體可