小鼠巨細(xì)胞病毒感染對(duì)仔鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響及其機(jī)制研究.pdf

1、目的：
　　 研究仔鼠巨細(xì)胞病毒(murine cytomegalovirus，MCMV)顱內(nèi)感染對(duì)海馬局部Ca2+與蛋白激酶C(PKC)表達(dá)水平的影響。
　　 方法：
　　 體外細(xì)胞培養(yǎng)法制備MCMV Smith株，細(xì)胞病變法(CPE)測(cè)定病毒致半數(shù)細(xì)胞感染量(TCID50)。ELISA法篩選MCMV IgM、IgG均陰性的BABL/C小鼠，雌雄小鼠交配受孕，待分娩后隨機(jī)選擇乳鼠分為病毒組和對(duì)照組，于生后24小

2、時(shí)內(nèi)分別顱內(nèi)注射病毒懸液10微升和等量無(wú)菌生理鹽水。觀察各組幼鼠的生存發(fā)育情況，待14d后各取兩組10只仔鼠，無(wú)菌采集仔鼠腦組織，采用PCR法檢測(cè)有無(wú)MCMV感染。
　　 其余仔鼠待其70d后無(wú)菌采集海馬組織，應(yīng)用免疫組化技術(shù)及熒光分光光度計(jì)法分別檢測(cè)PKC蛋白及Ca2+濃度的表達(dá)，并用光學(xué)顯微鏡觀察海馬組織的病理學(xué)改變。
　　 結(jié)果：
　　 1.病毒組和對(duì)照組仔鼠腦組織感染率分別為90[％]及0[％]，x2=1

3、6.36，P<0.05；病毒組與對(duì)照組成活率分別為28.17[％]及100[％]，x2=0.003，P<0.05。
　　 2.病毒組和對(duì)照組海馬神經(jīng)元細(xì)胞內(nèi)的Ca2+濃度分別為221.48±21.36及118.75±40.85，t=10.957，P<0.05。
　　 3.病毒組和對(duì)照組蛋白質(zhì)表達(dá)水平分別為0.12±0.02及0.14±0.03，t=2.766，P<0.05。
　　 4.海馬病理學(xué)組織切片可見(jiàn)病毒組