Ras-Raf-MAPK信號(hào)傳導(dǎo)通路與病理性瘢痕和瘢痕癌相關(guān)性研究.pdf

1、目的：探討Ras/Raf/MAPK信號(hào)通路和通路下游靶基因CyclinD1與病理性瘢痕及瘢痕癌的相關(guān)性，分析病理性瘢痕癌變的相關(guān)因素，探討瘢痕癌靶向治療靶點(diǎn)的可行性。
　　 方法：(1)運(yùn)用激光掃描共聚焦顯微技術(shù)，對(duì)15例病理性瘢痕和25例瘢痕癌石蠟組織切片中K-ras、H-ras、N-ras和CyclinD1進(jìn)行免疫熒光雙標(biāo)記，并采集三維立體圖象。(2)采用免疫組織化學(xué)(SP)法分別檢測(cè)10例正常皮膚組織，15例病理性瘢痕和2

2、0例瘢痕癌三組組織中MAPK、CyclinD1蛋白的表達(dá)。(3)采用核酸分子原位雜交技術(shù)檢測(cè)三組組織中MAPKmRNA、CyclinD1mRNA的表達(dá)。(4)結(jié)合圖像分析，分別計(jì)算被檢組織中所檢各項(xiàng)指標(biāo)的平均光密度和陽(yáng)性面積，所有數(shù)據(jù)運(yùn)用SPSS16.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　 結(jié)果：(1)激光掃描共聚焦顯微結(jié)果：K-ras、H-ras、N-rag和CyclinD1在病理性瘢痕上皮中呈現(xiàn)較弱熒光，為弱陽(yáng)性表達(dá)；在瘢痕癌組織中

3、呈現(xiàn)較強(qiáng)熒光，為強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)。其表達(dá)部位和表達(dá)強(qiáng)度與免疫組織化學(xué)標(biāo)記結(jié)果相一致。(2)MAPK蛋白、MAPKmRNA在正常皮膚表皮呈陰性表達(dá)，在皮膚病理性瘢痕上皮中呈弱陽(yáng)性表達(dá)，在瘢痕癌組織中呈強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)。瘢痕癌組表達(dá)水平(陽(yáng)性面積)、表達(dá)強(qiáng)度(平均光密度)與正常皮膚、病理性瘢痕組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；但正常皮膚組與病理性瘢痕組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。(3)CyclinD1蛋白、CyclinD1mRNA

4、在正常皮膚表皮呈陰性表達(dá)，在病理性瘢痕上皮中呈弱陽(yáng)性表達(dá)，在瘢痕癌組織中呈強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)。瘢痕癌組的表達(dá)(即陽(yáng)性面積和平均光密度)與正常皮膚組及病理性瘢痕組相比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；但正常皮膚組與病理性瘢痕組相比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。(4)相關(guān)性分析：在瘢痕癌組織中，MAPK與MAPKmRNA的表達(dá)、CyclinD1與CyclinD1mRNA的表達(dá)、CyclinD1與MAPK蛋白的表達(dá)、CyclinD1mR

5、NA與MAPKmRNA的表達(dá)均呈正相關(guān)。
　　 結(jié)論：(1)通路中的Ras、MAPK、CyclinD1蛋白及其MAPKmRNA、CyclinD1mRNA在病理性瘢痕上皮中的低表達(dá)，提示與病理性瘢痕上皮癌變的相關(guān)性意義有限。(2)通路中的Ras、MAPK、CyclinD1蛋白及其MAPKmRNA、CyclinD1mRNA在瘢痕癌中的高表達(dá)，可能與瘢痕癌的發(fā)生有相關(guān)性，各種基因共同發(fā)揮了協(xié)同作用。(3)通路中的Ras、MAPK、Cy