Ras-Raf-MAPK信號傳導通路與病理性瘢痕和瘢痕癌相關性研究.pdf

1、目的：探討Ras/Raf/MAPK信號通路和通路下游靶基因CyclinD1與病理性瘢痕及瘢痕癌的相關性，分析病理性瘢痕癌變的相關因素，探討瘢痕癌靶向治療靶點的可行性。
　　 方法：(1)運用激光掃描共聚焦顯微技術，對15例病理性瘢痕和25例瘢痕癌石蠟組織切片中K-ras、H-ras、N-ras和CyclinD1進行免疫熒光雙標記，并采集三維立體圖象。(2)采用免疫組織化學(SP)法分別檢測10例正常皮膚組織，15例病理性瘢痕和2

2、0例瘢痕癌三組組織中MAPK、CyclinD1蛋白的表達。(3)采用核酸分子原位雜交技術檢測三組組織中MAPKmRNA、CyclinD1mRNA的表達。(4)結合圖像分析，分別計算被檢組織中所檢各項指標的平均光密度和陽性面積，所有數(shù)據(jù)運用SPSS16.0軟件包進行統(tǒng)計學分析。
　　 結果：(1)激光掃描共聚焦顯微結果：K-ras、H-ras、N-rag和CyclinD1在病理性瘢痕上皮中呈現(xiàn)較弱熒光，為弱陽性表達；在瘢痕癌組織中

3、呈現(xiàn)較強熒光，為強陽性表達。其表達部位和表達強度與免疫組織化學標記結果相一致。(2)MAPK蛋白、MAPKmRNA在正常皮膚表皮呈陰性表達，在皮膚病理性瘢痕上皮中呈弱陽性表達，在瘢痕癌組織中呈強陽性表達。瘢痕癌組表達水平(陽性面積)、表達強度(平均光密度)與正常皮膚、病理性瘢痕組比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.01)；但正常皮膚組與病理性瘢痕組比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。(3)CyclinD1蛋白、CyclinD1mRNA

4、在正常皮膚表皮呈陰性表達，在病理性瘢痕上皮中呈弱陽性表達，在瘢痕癌組織中呈強陽性表達。瘢痕癌組的表達(即陽性面積和平均光密度)與正常皮膚組及病理性瘢痕組相比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.01)；但正常皮膚組與病理性瘢痕組相比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。(4)相關性分析：在瘢痕癌組織中，MAPK與MAPKmRNA的表達、CyclinD1與CyclinD1mRNA的表達、CyclinD1與MAPK蛋白的表達、CyclinD1mR

5、NA與MAPKmRNA的表達均呈正相關。
　　 結論：(1)通路中的Ras、MAPK、CyclinD1蛋白及其MAPKmRNA、CyclinD1mRNA在病理性瘢痕上皮中的低表達，提示與病理性瘢痕上皮癌變的相關性意義有限。(2)通路中的Ras、MAPK、CyclinD1蛋白及其MAPKmRNA、CyclinD1mRNA在瘢痕癌中的高表達，可能與瘢痕癌的發(fā)生有相關性，各種基因共同發(fā)揮了協(xié)同作用。(3)通路中的Ras、MAPK、Cy