經(jīng)蛛網(wǎng)膜下腔置管局部應用GDNF對脊髓前角運動神經(jīng)元的保護作用研究.pdf

1、周圍神經(jīng)損傷在臨床上十分常見，近些年隨著顯微外科的發(fā)展，神經(jīng)斷端顯微縫合技術(shù)的日臻完善，取得了一定的成績，但臨床療效仍不十分理想。研究發(fā)現(xiàn)，周圍神經(jīng)損傷后軸索逆向運輸?shù)纳窠?jīng)營養(yǎng)因子缺乏是造成神經(jīng)元發(fā)生凋亡的原因之一，提供外源性神經(jīng)營養(yǎng)因子則可以促進神經(jīng)元的存活。為了提高受損神經(jīng)元的存活率，部分學者利用神經(jīng)軸突的逆向軸漿運輸原理，通過動物實驗在給藥途徑上進行了有益的探索，如神經(jīng)斷端給藥和靶肌肉注射給藥等。 實驗目的：研究周圍神經(jīng)損

2、傷后經(jīng)蛛網(wǎng)膜下腔置管應用外源性膠質(zhì)細胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(glial cell 1ine-derived neurotrophic factor，GDNF)對脊髓前角運動神經(jīng)元的保護作用，為臨床提高神經(jīng)損傷修復的療效提供實驗依據(jù)。 方法：成年SD大鼠共48只，雄性，隨機分為2組，實驗組(坐骨神經(jīng)切斷再吻合后給予GDNF)和對照組(切斷再吻合后給予生理鹽水)各24只。采用切斷大鼠左側(cè)坐骨神經(jīng)致相應運動神經(jīng)元損傷動物模型。腹腔麻醉，取

3、左股后正中切口，暴露坐骨神經(jīng)，切斷股方肌下緣約1cm處神經(jīng)干，再用9-0的無創(chuàng)線行神經(jīng)外膜縫合，在SD鼠薦結(jié)節(jié)連線與棘突連線交點約第五、六腰椎椎間隙做蛛網(wǎng)膜下腔置管，用微量進樣器通過留置管注入外源性GDNF6μl(10μg/ml)，對照組注入生理鹽水6μl，連注十日。于2、4、8周行坐骨神經(jīng)功能指數(shù)檢測。不同時間處死動物并取材，對L4～6節(jié)段脊髓標本冰凍切片，行HE染色，尼氏體染色、膽堿酯酶染色。 結(jié)果：術(shù)后1周，即可觀察到手術(shù)

4、側(cè)脊髓前角廣泛水腫，神經(jīng)元數(shù)量減少，染色淡。NS組偶可發(fā)現(xiàn)凋亡細胞，GDNF組傷后病理改變與NS組相似，但神經(jīng)元腫脹程度和數(shù)量減少程度均較NS組輕。尼氏體染色發(fā)現(xiàn)NS組1周后脊髓前角運動神經(jīng)元存活率下降35％左右，第二周下降40％左右，膽堿酯酶陽性顆粒面積減少40％左右，并維持在這一水平。GDNF組脊髓前角運動神經(jīng)元的存活率、膽堿酯酶陽性顆粒面積均比NS組有明顯提高，兩組差異有顯著性(P<0.05)；坐骨神經(jīng)功能指數(shù)亦優(yōu)于對照組。