多烯紫杉醇誘導(dǎo)K562細胞延遲凋亡反應(yīng)過程的研究.pdf

1、以人急性髓系白血病(AML)HL60細胞和慢性髓系紅白血病(CML)K562細胞為模型，研究了多烯紫杉醇細胞特異性的增殖抑制和誘發(fā)凋亡作用。從自由基和抗氧化系統(tǒng)、MAPK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路、細胞周期及凋亡相關(guān)蛋白等方面考察了多烯紫杉醇誘導(dǎo)兩種細胞凋亡過程的差異及關(guān)鍵蛋白和信號途徑。同時，建立腫瘤細胞生長及其與藥物作用關(guān)系的細胞周期數(shù)學(xué)模型，研究了多烯紫杉醇誘導(dǎo)K562細胞周期變化與凋亡現(xiàn)象及其量效關(guān)系。 研究結(jié)果表明，K562細胞對多

2、烯紫杉醇呈現(xiàn)一種延遲的凋亡反應(yīng)。ROS和JNK/SAPK信號通路參與了多烯紫杉醇誘導(dǎo)HL-60細胞的凋亡過程，而K562細胞在多烯紫杉醇作用前后胞內(nèi)外的活性氧和相應(yīng)的酶活均無顯著變化，ERK和p38信號通路參與調(diào)控其凋亡過程。K562細胞中高活性的bcr-abl上調(diào)ERK/MAPK通路，經(jīng)尚未闡明的中間環(huán)節(jié)，導(dǎo)致Caspase-3激活延遲，對凋亡產(chǎn)生一定的延遲反應(yīng)。多烯紫杉醇與微管蛋白相互作用，磷酸化Bcl-2蛋白，啟動一種G2/M期阻

3、斷依賴的慢性凋亡機制，通過抑制ERK激酶的活性、活化p38蛋白激酶而激活Caspase-3蛋白酶，促進K562細胞凋亡。其中，癌蛋白p18、RAN結(jié)合蛋白1、醛酮變位酶I，ERK途徑相關(guān)蛋白14-3-3epsiloin、PCNA、轉(zhuǎn)錄延伸因子，p38途徑相關(guān)蛋白細胞核核糖核蛋白A2/B1可能是K562細胞凋亡延遲相關(guān)的蛋白。多烯紫杉醇則誘導(dǎo)HL-60細胞通過NADPH氧化酶途徑產(chǎn)生ROS迅速激活Caspase-3，進而導(dǎo)致后續(xù)的JNK/

4、SAPK活化及Bcl-2磷酸化。磷酸化的Bcl-2進一步促進ROS的生成及Caspase-3的活化。最初的凋亡刺激在這個環(huán)狀的級聯(lián)途徑中被不斷放大，導(dǎo)致Caspase-3的不斷激活，最終導(dǎo)致細胞凋亡。 細胞周期模型結(jié)果顯示多烯紫杉醇引起K562細胞m期阻斷和誘導(dǎo)細胞凋亡的飽和濃度分別為17.96nmol·L-1、7.82nmmol·L-1，有效濃度分別為2.6nmmol·L-1，1.69nmol·L-1；低濃度(1.69nmmo