扇貝多肽經(jīng)線粒體通路抑制UVB誘導(dǎo)的HaCaT細(xì)胞凋亡.pdf

1、目的：復(fù)制20 mJ·-2中波紫外線(UVB)誘導(dǎo)的HaCaT細(xì)胞凋亡模型，探討線粒體內(nèi)源性通路在扇貝多肽(polypeptide from chlamys farreri，PCF)抑制UVB誘導(dǎo)HaCaT細(xì)胞凋亡中的作用機(jī)制。 方法：實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)為：正常對(duì)照組、20 mJ·cm-2 UVB模型組、UVB+1.42 mmol-L-1 PCF組、UVB+2.48 mmol-L-1 PCF組、UVB+5.69 mmol-L-1 PCF組

2、和UVB+5.68 mmoI-L-1維生素C(Vit C)陽性對(duì)照組。采用Hoechst33258染色法結(jié)合瓊脂糖凝膠電泳檢測各組HaCaT細(xì)胞凋亡，蛋白印跡法(Westernblot)檢測胞漿內(nèi)Smac、XIAP、Apaf-1和caspase-9的蛋白表達(dá)水平，RT-PCR檢測XIAP mRNA的表達(dá)。 結(jié)果：UVB模型組與正常對(duì)照組比較，細(xì)胞凋亡率明顯增加(P<0.01)，從線粒體釋放至胞漿的Smac的蛋白含量，Apaf-1

3、的蛋白表達(dá)和caspase-9的活性明顯增加(P<0.05，P<0.01)，XIAP的蛋白和基因表達(dá)顯著減少(P<0.05，P<0.01)；預(yù)先加入藥物各組與UVB模型組相比，細(xì)胞凋亡率降低(P<0.05，P<0.01); PCF各劑量組與UVB模型組相比，胞漿Smac的蛋白含量，Apaf-1的蛋白表達(dá)和caspase-9的活性均明顯降低(P<0.05，P<0.01)，XIAP的蛋白及基因表達(dá)顯著增加(P<0.05，P<0.01)，且P