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1、目的:復(fù)制UVA誘導(dǎo)的HaCaT細(xì)胞凋亡模型,探究UVA對(duì)HaCaT細(xì)胞腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(tumour necrosis factor related apoptosis inducing ligand,TRAIL)表達(dá)的影響及TRAIL是否參與了UVA誘導(dǎo)的HaCaT細(xì)胞凋亡;研究扇貝多肽(Polypeptide from Chlamys farreri,PCF)對(duì)UVA誘導(dǎo)的HaCaT細(xì)胞Fas、TRAIL凋亡通路的影響
2、。 方法:實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)分為5組:對(duì)照組、UVA模型組、UVA+5.69 mmol·L-1 PCF組、UVA+2.84 mmol·L-1PCF組、UVA+1.42 mmol·L-1PCF組。瓊脂糖凝膠電泳分析TRAIL中和性抗體對(duì)UVA誘導(dǎo)的HaCaT細(xì)胞凋亡的影響;熒光定量PCR檢測(cè)TRAIL mRNA表達(dá);RT-PCR檢測(cè)Fas mRNA表達(dá);蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)TRAIL、Fas、FADD蛋白表達(dá)及caspase-8活性。
3、結(jié)果:8J·cm-2 UVA照射HaCaT細(xì)胞后TRAIL mRNA及蛋白表達(dá)增加,與對(duì)照組相比差異顯著(p<0.01);TRAIL中和性抗體對(duì)UVA誘導(dǎo)的HaCaT細(xì)胞凋亡有抑制作用;1.42~5.69 mmol·L-1劑量范圍內(nèi)的PCF可劑量依賴性抑制UVA引起的HaCaT細(xì)胞TRAIL、Fas mRNA及蛋白表達(dá)(P<0.05,P<0.01);PCF對(duì)UVA引起的HaCaT細(xì)胞FADD蛋白表達(dá)及caspase-8的活化有抑制作用,
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