硼替佐米與吡喃阿霉素序貫對(duì)T細(xì)胞淋巴瘤Hut-78細(xì)胞系的協(xié)同作用.pdf

1、T細(xì)胞非霍奇金淋巴瘤是我國(guó)高發(fā)的非霍奇金淋巴瘤類型，約占所有非霍奇金淋巴瘤的30％以上。目前，國(guó)內(nèi)外尚缺乏理想的治療方案，常規(guī)應(yīng)用的CHOP方案（環(huán)磷酰胺、阿霉素、長(zhǎng)春新堿、潑尼松龍）近期有效率尚可，但遠(yuǎn)期療效很差，患者預(yù)后不良，生存期較短。因而急需尋找有效的抗癌藥物及其聯(lián)合治療方案以提高療效并改善患者的預(yù)后。 硼替佐米是首個(gè)進(jìn)行臨床研究的蛋白酶體抑制劑，已被批準(zhǔn)用于治療多發(fā)性骨髓瘤及部分B細(xì)胞非霍奇金淋巴瘤的亞型，而對(duì)于T細(xì)胞

2、淋巴瘤的抗腫瘤作用尚不明確。本實(shí)驗(yàn)旨在探討硼替佐米對(duì)T細(xì)胞非霍奇金淋巴瘤細(xì)胞系Hut-78的體外抗腫瘤效應(yīng)，同時(shí)觀察硼替佐米與吡喃阿霉素聯(lián)合對(duì)Hut-78細(xì)胞是否具有協(xié)同或疊加作用，初步分析序貫給藥對(duì)細(xì)胞增殖和凋亡的影響及其可能的作用機(jī)理，為確定最佳的治療方案提供理論依據(jù)。 方法： 1.采用MTT比色法分別檢測(cè)硼替佐米、吡喃阿霉素對(duì)人皮膚T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞株Hut-78生長(zhǎng)的抑制作用。 2.采用MTT比色法檢測(cè)硼替

3、佐米與吡喃阿霉素聯(lián)合對(duì)Hut-78細(xì)胞增殖的抑制作用，采用中效原則分析藥物之間的相互作用。 3.應(yīng)用PI染色法分別檢測(cè)硼替佐米、吡喃阿霉素單藥及序貫給藥對(duì)Hut-78細(xì)胞周期的阻滯效應(yīng)。 4.應(yīng)用Annexin-Ⅴ法分別檢測(cè)硼替佐米、吡喃阿霉素單藥及序貫給藥對(duì)Hut-78細(xì)胞凋亡的影響。 結(jié)果： 1.硼替佐米、吡喃阿霉素單藥對(duì)Hut-78細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制效應(yīng)。 MTT比色法檢測(cè)結(jié)果顯示，不同濃度的

4、硼替佐米和吡喃阿霉素單藥與Hut-78細(xì)胞共培養(yǎng)24h和48h后，能夠明顯抑制腫瘤細(xì)胞增殖，其生長(zhǎng)抑制率與藥物濃度呈正相關(guān)（P<0．01），表明呈劑量依賴性；且48h的抑制率明顯高于24h抑制率（P<0．01），表明呈時(shí)間依賴性。 2.硼替佐米與吡喃阿霉素聯(lián)合不同給藥順序?qū)ut-78生長(zhǎng)抑制的影響。 以先吡喃阿霉素后硼替佐米（THP→BTZ），硼替佐米、吡喃阿霉素同時(shí)給藥（BTZ+THP），先硼替佐米后吡喃阿霉素（BT

5、Z→THP）三種給藥方式分別處理Hut-78細(xì)胞48h后，結(jié)果顯示，BTZ→THP、BTZ+THP兩種給藥順序均具有協(xié)同作用。尤以BTZ→THP組更為顯著，隨著藥物濃度的增加，其效應(yīng)腫瘤抑制率（fa）逐漸升高，聯(lián)合指數(shù)（CI）值呈降低趨勢(shì)；BTZ+THP組隨濃度增加，其fa逐漸升高，CI值呈升高趨勢(shì)。而THP→BTZ組僅在一定范圍內(nèi)有協(xié)同作用。因此，BTZ→THP的協(xié)同作用最佳。 3.單藥硼替佐米以劑量依賴的形式誘導(dǎo)細(xì)胞停滯于G

6、2/M期，而單藥吡喃阿霉素對(duì)細(xì)胞周期無(wú)明顯影響，序貫應(yīng)用THP可顯著增加BTZ所誘導(dǎo)的G2/M期阻滯效應(yīng)。 4.流式細(xì)胞儀檢測(cè)表明，硼替佐米、吡喃阿霉素單藥均可劑量依賴性地誘導(dǎo)Hut-78細(xì)胞凋亡，且BTZ→THP組的細(xì)胞凋亡率顯著高于硼替佐米或吡喃阿霉素單藥治療組（P<0．01）。 結(jié)論： 硼替佐米與吡喃阿霉素聯(lián)合體外可有效抑制Hut-78細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)其凋亡，序貫應(yīng)用可產(chǎn)生高度協(xié)同的細(xì)胞毒效應(yīng)。本研究表明硼替