他克莫司改善腎缺血再灌注損傷時(shí)對(duì)Bcl-2蛋白、TNF-a表達(dá)的影響.pdf

1、目的： 他克莫司是目前運(yùn)用于器官移植后抗排異反應(yīng)的新型免疫抑制藥物，在使用過程中，有學(xué)者發(fā)現(xiàn)它具有改善缺血再灌注損傷的特性。本課題通過建立大鼠腎缺血再灌注損傷模型，研究他克莫司改善腎缺血再灌注損傷的作用以及對(duì)Bcl-2蛋白、TNF-a表達(dá)的影響，從而為預(yù)防和治療腎臟缺血再灌注損傷提供新的措施。 方法： 選用健康雄性Wistar大鼠60只，隨機(jī)分為三組：假手術(shù)(sham)組、對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)組，每組20只。假手術(shù)組僅開

2、腹、分離腎動(dòng)脈，不阻斷血流；對(duì)照組于缺血前6h經(jīng)尾靜脈注射生理鹽水1ml；實(shí)驗(yàn)組于缺血前6h經(jīng)尾靜脈注射他克莫司(0.2g/L0.5mg/kg)。在到達(dá)設(shè)定的不同再灌注時(shí)間點(diǎn)取血及腎臟標(biāo)本，全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定血清肌酐(Cr)、血清尿素氮(BUN)；酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA法)測(cè)定血清腫瘤壞死因子(TNF-a)含量；免疫組化(SP法)檢測(cè)腎組織B細(xì)胞淋巴瘤(Bcl-2)；采用HE染色分析腎組織病理損傷程度。 結(jié)果： 1

3、．再灌注后血清Cr、BUN的變化：實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的血清Cr、BUN在相應(yīng)再灌注備時(shí)間點(diǎn)的值均高于假手術(shù)組；對(duì)照組，缺血45分鐘，再灌注0.5h、2h、6h及24h隨著再灌注時(shí)間的延長(zhǎng)血清Cr、BUN是明顯的升高；實(shí)驗(yàn)組，缺血45分鐘，再灌注0.5h、2h及6h隨著再灌注時(shí)間的延長(zhǎng)血清Cr、BUN有不明顯的升高，而在再灌注24h，血清Cr、BUN出現(xiàn)了降低；在再灌注2h、6h和24h時(shí)，實(shí)驗(yàn)組血清Cr、BUN的水平顯著低于對(duì)照組(P＜0.

4、05)。 2．血清FNF-a的變化：對(duì)照組，缺血45分鐘，再灌注0.5h、2h、6h及24h隨著再灌注時(shí)間的延長(zhǎng)血清TNF-a含量明顯升高；實(shí)驗(yàn)組，缺血45分鐘，再灌注0.5h、2h及6h隨著再灌注時(shí)間的延長(zhǎng)血清TNF-a含量有不明顯的升高，而在再灌注24h，血清INF-a含量出現(xiàn)了降低；在再灌注的各時(shí)間點(diǎn)，實(shí)驗(yàn)組的血清TNF-α含量水平均顯著低于對(duì)照組(P＜0.05)。 3．腎組織Bcl-2的表達(dá)：各組大鼠腎組織中均有

5、Bcl-2表達(dá)，主要在腎的遠(yuǎn)曲小管、近曲小管表達(dá)，但免疫反應(yīng)強(qiáng)度不同。實(shí)驗(yàn)組在再灌注的各時(shí)間點(diǎn)均高于對(duì)照組，并在再灌注的2h、6h、24h的Bcl-2免疫反應(yīng)強(qiáng)度顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)。 4．腎組織的病理變化：在光鏡下，對(duì)照組，在再灌注各時(shí)間點(diǎn)均出現(xiàn)腎小管擴(kuò)張、腎小管上皮細(xì)胞明顯腫脹、空泡變性、間質(zhì)血管擴(kuò)張充血，而在再灌注的6h、24h可見腎小管上皮細(xì)胞扁平、脫落、基底膜裸露；實(shí)驗(yàn)組，在再灌注的各時(shí)間點(diǎn)腎小管及腎小管上皮