轉(zhuǎn)錄共抑制因子MINT對(duì)軟骨細(xì)胞分化的調(diào)控作用機(jī)理的研究.pdf

1、 本文首先在酵母中發(fā)現(xiàn)MINT與AlphaA-CRYBP1存在相互作用，進(jìn)而通過體外的GST-pull down和體內(nèi)免疫共沉淀及哺乳動(dòng)物雙雜交分析進(jìn)一步證實(shí)MINT與AlphaA-CRYBP1之間確實(shí)存在物理的相互作用。同時(shí)通過ChIP和EMSA實(shí)驗(yàn)證明了MINT和AlphaA-CRYBP1可以以復(fù)合物的形式結(jié)合于Ⅱ型膠原基因的增強(qiáng)子序列上。以上結(jié)果提示我們MINT可能通過AlphaA-CRYBP1參與Ⅱ型膠原的表達(dá)調(diào)控。最后我

2、們通過構(gòu)建報(bào)告基因系統(tǒng)，在軟骨細(xì)胞和非軟骨細(xì)胞中證明了，MINT或其C段可以通過CRYBP1抑制Ⅱ型膠原基因的增強(qiáng)子的轉(zhuǎn)錄激活活性，并且這種抑制作用表現(xiàn)為HDAC依賴性。結(jié)果說明：MINT通過募集HDAC,參與了CRYBP1所介導(dǎo)的對(duì)Ⅱ型膠原基因的轉(zhuǎn)錄抑制，進(jìn)而可能參與軟骨發(fā)育的調(diào)控。 本研究首次發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)錄因子AlphaA-CRYBP1與MINT存在相互作用，并且能以復(fù)合物的形式結(jié)合于Ⅱ型膠原基因的增強(qiáng)子序列上。并進(jìn)一步證明了這種