乙酰肝素酶與肝癌侵襲轉(zhuǎn)移關(guān)系的研究.pdf

1、肝細(xì)胞肝癌是我國(guó)最常見的惡性腫瘤之一，惡性程度高，易早期發(fā)生轉(zhuǎn)移，而且手術(shù)或介入治療后復(fù)發(fā)率較高，原因在于肝癌易侵襲轉(zhuǎn)移。明確其侵襲轉(zhuǎn)移的發(fā)生機(jī)制和探索有效的治療方法依然是臨床上面臨的嚴(yán)峻挑戰(zhàn)。研究發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移與細(xì)胞外基質(zhì)、血管基底膜降解及腫瘤微血管生成密切相關(guān)。硫酸乙酰肝素蛋白多糖是細(xì)胞外基質(zhì)和血管基底膜的主要成分。乙酰肝素酶是一種葡萄糖醛酸內(nèi)切酶，也是目前發(fā)現(xiàn)的唯一可以降解HS活性的酶，它通過(guò)切斷硫酸乙酰肝素蛋白多糖側(cè)鏈以

2、降解細(xì)胞外基質(zhì)和血管基底膜，并且能釋放和活化硫酸乙酰肝素蛋白多糖結(jié)合型的生長(zhǎng)因子(如bFGF，VEGF等)誘導(dǎo)血管生成，從而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移。隨著乙酰肝素酶與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移關(guān)系研究的深入進(jìn)行，乙酰肝素酶將成為腫瘤治療的新靶點(diǎn)。 第一部分乙酰肝素酶在肝細(xì)胞肝癌中的表達(dá)及其臨床意義目的：通過(guò)對(duì)肝細(xì)胞肝癌的癌組織、癌旁肝組織、正常肝組織及肝癌細(xì)胞株中HpamRNA表達(dá)的檢測(cè)，研究HpamRNA表達(dá)與HCC侵襲轉(zhuǎn)移等生物學(xué)特性之間

3、的的關(guān)系，明確HCC侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制和在分子水平干預(yù)腫瘤細(xì)胞穿越由細(xì)胞外基質(zhì)和基底膜組成的屏障，進(jìn)而抑制腫瘤血管生成，預(yù)防復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 第二部分乙酰肝素酶與肝細(xì)胞肝癌血管生成關(guān)系的研究目的：Hpa促進(jìn)腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移的機(jī)制，除可以破壞ECM和BMs的完整性，有利于腫瘤細(xì)胞穿越ECM和血管壁外；另一重要原因就是促使HSPG釋放和活化肝素結(jié)合型的生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)血管生成，其中最重要的生長(zhǎng)因子是血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF

4、)和堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(b-FGF)。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)肝癌、癌旁組織及正常肝組織中Hpa、VEGF、b-FGF的蛋白水平表達(dá)和微血管密度(MVD)的檢測(cè)，探討三者與肝細(xì)胞肝癌血管新生及侵襲轉(zhuǎn)移特性之間的關(guān)系，以及Hpa和VEGF、b-FGF之間的關(guān)系，明確Hpa通過(guò)誘導(dǎo)血管新生促進(jìn)肝癌侵襲轉(zhuǎn)移的機(jī)制。 第三部分乙酰肝素酶反義寡核苷酸對(duì)肝癌侵襲轉(zhuǎn)移的影響目的：將Hpa反義硫代寡脫氧核苷酸轉(zhuǎn)染入肝癌細(xì)胞株，通過(guò)檢測(cè)HpamRN