miR-135b在肝癌細(xì)胞侵襲與轉(zhuǎn)移中的作用及其分子機(jī)制.pdf

1、MicroRNAs(miRNAs)是一類高度保守的小分子單鏈非編碼RNA，具有轉(zhuǎn)錄后調(diào)控基因表達(dá)的功能。我們?cè)诟伟┗蚪M拷貝數(shù)變化區(qū)域篩選到18個(gè)miRNA分子，經(jīng)過分析發(fā)現(xiàn)miR-135b拷貝數(shù)擴(kuò)增且表達(dá)量上調(diào)。體外和體內(nèi)實(shí)驗(yàn)顯示 miR-135b能顯著促進(jìn)肝癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移。進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn) miR-135b能抑制細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)的粘附，增強(qiáng)分泌到細(xì)胞外的MMP2(matrix metallopeptidase2)和MMP9(matrix

2、 metallopeptidase9)活性，并且能促進(jìn)應(yīng)力纖維的形成。結(jié)合mRNA芯片、生物信息學(xué)和螢光素酶報(bào)告載體系統(tǒng)分析發(fā)現(xiàn)RECK(reversion-inducing-cysteine-rich protein with kazal motifs)和EVI5(ecotropic viral integration site5)是miR-135b的兩個(gè)直接靶基因。RECK和EVI5能抑制肝癌的遷移和侵襲。miR-135b通過下調(diào)這

3、兩個(gè)靶基因發(fā)揮促進(jìn)遷移和侵襲的作用。RECK和EVI5在miR-135b抑制細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)粘附及增強(qiáng)MMP2和MMP9活性的過程都發(fā)揮作用；另外EVI5還可參與 miR-135b促進(jìn)應(yīng)力纖維的形成過程。最后，染色質(zhì)免疫沉淀(ChIP)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn) HSF1能結(jié)合在 miR-135b上游引起miR-135b表達(dá)上調(diào)。同時(shí)，實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn) HSF1能促進(jìn)肝癌細(xì)胞的遷移和侵襲，并且這一過程中miR-135b發(fā)揮一定的作用。這些發(fā)現(xiàn)為肝癌轉(zhuǎn)移提供了新的