奧硝唑甲磺酸培氟沙星緩釋牙栓體內(nèi)外釋放度的測(cè)定.pdf

1、背景：牙周炎是一種常見、多發(fā)的牙周組織炎癥破壞性疾病，是造成成年人失牙的主要原因之一。現(xiàn)已證實(shí)牙菌斑中細(xì)菌及其產(chǎn)物是引發(fā)牙周病必須的始動(dòng)因子，其他的一些局部因素及宿主的防御反應(yīng)也對(duì)牙周病的發(fā)生發(fā)展產(chǎn)生重要影響。對(duì)牙周病的治療應(yīng)是綜合治療，其中抗菌藥物是治療牙周病的一種有效的輔助手段。全身使用抗菌藥物，能抑制侵入牙周組織或口腔其他部位(如扁桃體、舌背等處)的潛在致病菌。但即使全身大劑量使用藥物，藥物仍大多集中于血清，要求反復(fù)給藥，可能出現(xiàn)

2、口腔菌群失調(diào)，毒副作用增加，依從性較差等不良影響。為克服上述問題，國內(nèi)外學(xué)者提出了局部抗菌藥物治療牙周病的方案。局部用藥能在減少用藥劑量的同時(shí)提高病變部位有效藥物濃度，可以達(dá)到全身治療藥物濃度的10～100倍，降低毒副作用、耐藥性的發(fā)生幾率，依從性更好。其中，局部使用緩(控)釋制劑優(yōu)越性更為突出，具有用藥劑量小，藥效持續(xù)時(shí)間長，給藥次數(shù)少，有利于降低藥物毒副作用，避免出現(xiàn)血藥濃度峰谷現(xiàn)象的優(yōu)點(diǎn)。 目的：本研究首先利用SD大鼠建立

3、一種近似人類臨床牙周炎的牙周炎動(dòng)物模型，找出一種較合理的建立牙周炎動(dòng)物模型的方法。再利用高效液相色譜法測(cè)定奧硝唑甲磺酸培氟沙星緩釋牙栓中奧硝唑與甲磺酸培氟沙星體外釋藥特點(diǎn)，為體內(nèi)釋放度的測(cè)定提供依據(jù)。最后在動(dòng)物模型體內(nèi)利用高效液相色譜法測(cè)定奧硝唑甲磺酸培氟沙星緩釋牙栓中動(dòng)物體內(nèi)的釋藥特點(diǎn)，為臨床實(shí)驗(yàn)用藥提供依據(jù)。 材料和方法： 1．選12月齡SD大鼠36只，雌雄各半，體重220±20 g，將36只大鼠隨機(jī)分為3組，每組1

4、2只，分籠飼養(yǎng)。第一組為正常對(duì)照組(N)：只用3％戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉，常規(guī)喂養(yǎng)鼠料和水；第二組為牙齦剝離+高糖飲食+結(jié)扎(P1)：同N組方法麻醉后，先將右上頜第一磨牙牙周與牙根面分離，然后用正畸鋼絲結(jié)扎牙頸部，并從實(shí)驗(yàn)當(dāng)天開始喂養(yǎng)高糖飼料；第三組為牙齦剝離+高糖飲食+結(jié)扎+牙齦卟啉單胞菌(P<,2>)：在P<,1>組的基礎(chǔ)上，從結(jié)扎后1周開始，隔日口腔接種致病菌1次，即牙齦卟啉單胞菌，共接種5次。綜合評(píng)定最佳建立牙周炎動(dòng)物模型的方法

5、。 2．奧硝唑甲磺酸培氟沙星緩釋牙栓體外釋放度的測(cè)定：在37℃恒溫環(huán)境下，以脫氣純化水為溶出介質(zhì)，隨機(jī)抽取緩釋牙栓5枚置于盛有5ml脫氣純化水的燒杯中，每隔10分鐘攪動(dòng)一次，取樣時(shí)間分別為0．5，1，2，3，4，5，6，7，8，9，10，11，13，15，18，24 h。定時(shí)取樣200μl，并同時(shí)補(bǔ)足200μl溶出介質(zhì)。用高效液相色譜法測(cè)定并記錄奧硝唑及甲磺酸培氟沙星的峰面積積分值并計(jì)算出二者的累計(jì)釋放百分率。綜合判定奧硝唑甲磺

6、酸培氟沙星緩釋牙栓體外釋藥特點(diǎn)。 3．奧硝唑甲磺酸培氟沙星緩釋牙栓體內(nèi)釋放度的測(cè)定：取建成牙周炎動(dòng)物模型的SD大鼠36口，分為12組，每組3只；精密稱取緩釋牙栓36枚，每枚重9 mg，將牙栓放入大鼠牙周炎模型的牙周袋中，每只大鼠放入一枚，并分別于0．5、1、2、3、5、7、10、14、18、24、36、48 h處死一組大鼠，切取局部牙周組織置于Bp管中，加入內(nèi)標(biāo)和甲醇并定容至3 ml，超聲破碎儀破碎，離心，取上清液進(jìn)樣。綜合判定

7、奧硝唑甲磺酸培氟沙星緩釋牙栓在大鼠牙周袋中的釋藥特點(diǎn)。 結(jié)果： 1．N組大鼠在8周內(nèi)飲食較好，體重逐漸增加，未出現(xiàn)牙周炎癥狀；建立模型二組相比，P<,2>組炎癥發(fā)展快，4周時(shí)便可見到較明顯的牙周炎癥狀，8周時(shí)牙周炎癥狀進(jìn)一步加重，個(gè)體差異小。P<,1>組較P<,2>組慢，4周時(shí)也可見到牙周炎癥狀，但個(gè)體差異大，8周時(shí)形成深牙周袋，牙槽骨吸收，個(gè)體差異小。但在8周后，P<,1>、P<,2>組建立的牙周炎動(dòng)物模型效果都比較理

8、想，通過統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，二組沒有顯著性差異。 2．奧硝唑甲磺酸培氟沙星緩釋牙栓中奧硝唑與甲磺酸培氟沙星體外釋藥特點(diǎn)的測(cè)定：奧硝唑在0.5 h的釋放百分度為9.08％，5 h的累計(jì)釋放百分度為59.50％，13 h的累計(jì)釋放百分度為98.30％；甲磺酸培氟沙星在0.5 h的釋放百分度為15.26％，5 h的累計(jì)釋放百分度為45.00％，13 h的累計(jì)釋放百分度為96.01％。 3．奧硝唑甲磺酸培氟沙星緩釋牙栓中奧硝唑與甲磺酸培

9、氟沙星體內(nèi)釋藥特點(diǎn)的測(cè)定：奧硝唑甲磺酸培氟沙星緩釋牙栓在大鼠牙周袋中呈緩慢持續(xù)釋放，奧硝唑在24h的釋放百分度為71.7％，48 h的累計(jì)釋放百分度為87.2％；甲磺酸培氟沙星在24 h的釋放百分度為62.5％，48 h的累計(jì)釋放百分度為88.1％。 結(jié)論： 1．建立模型二組在8周中能夠較好的反映和模擬人類牙周病的變化過程。 2．體外釋藥實(shí)驗(yàn)表明該緩釋牙栓在體外環(huán)境中，能以有效藥物濃度持續(xù)釋藥超過12 h以上，且