馬錢(qián)苷、芍藥苷對(duì)高糖培養(yǎng)大鼠雪旺細(xì)胞增殖及其NGF、IGF-1表達(dá)的影響.pdf

1、目的:觀察馬錢(qián)苷、芍藥苷對(duì)高糖培養(yǎng)大鼠雪旺細(xì)胞(Schwan cells，SCs)增殖及神經(jīng)生長(zhǎng)因子NGF、IGF-1表達(dá)的影響，從而探討馬錢(qián)苷、芍藥苷治療糖尿病周?chē)窠?jīng)病變可能的機(jī)制。
　　方法:體外培養(yǎng)雪旺細(xì)胞，設(shè)立對(duì)照組，高糖模型組（50mMGlu），馬錢(qián)苷組（5μg·mL-1、10μg·mL-1、20μg·mL-1、40μg·mL-1），芍藥苷組（3μg·mL-1、6μg·mL-1、12μg·mL-1、24μg·mL-1）

2、。以不同濃度的馬錢(qián)苷和芍藥苷作用高糖培養(yǎng)的雪旺細(xì)胞48h后，采用四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)實(shí)驗(yàn)觀察馬錢(qián)苷和芍藥苷在不同濃度下對(duì)雪旺細(xì)胞增殖的影響。采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)(RT-PCR)檢測(cè)雪旺細(xì)胞NGF、IGF-1 mRNA的表達(dá)。采用免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測(cè)雪旺細(xì)胞NGF、IGF-1蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果:從MTT實(shí)驗(yàn)中觀察到，高糖可抑制雪旺細(xì)胞的增殖（與對(duì)照組相比，P＜0.05），而馬錢(qián)苷（10μg·mL-1、20μg·mL-1

3、、40μg·mL-1）和芍藥苷(6μg·mL-1、12μg·mL-1、24μg·mL-1)均具有不同程度的促進(jìn)高糖培養(yǎng)的雪旺細(xì)胞的增殖，從而對(duì)抗高糖環(huán)境對(duì)雪旺細(xì)胞增殖的抑制作用。從RT-PCR實(shí)驗(yàn)中觀察到，高糖組雪旺細(xì)胞NGF、IGF-1mRNA表達(dá)較對(duì)照組明顯減弱（P＜0.05);馬錢(qián)苷（5μg·mL-1、10μg·mL-1、20μg·mL-1、40μg·mL-1）NGF mRNA的表達(dá)與高糖組相比均有不同程度的升高，其中以20μg·

4、mL-1最為顯著（P＜0.05）;與高糖組相比，馬錢(qián)苷（20μg·mL-1、40μg·mL-1）IGF-1 mRNA的表達(dá)均有不同程度的升高（P＜0.05），而馬錢(qián)苷（5μg·mL-1、10μg·mL-1）IGF-1 mRNA的表達(dá)無(wú)明顯差異（P＞0.05);與高糖組相比，芍藥苷（6μg·mL-1、12μg·mL-1、24μg·mL-1）NGF mRNA、IGF-1 mRNA的表達(dá)均有不同程度的升高，其中以12μg·mL-1芍藥苷NGF

5、 mRNA、IGF-1 mRNA的表達(dá)最顯著（P＜0.05），而3μg·mL-1芍藥苷NGF mRNA、IGF-1 mRNA的表達(dá)無(wú)明顯差異(P＞0.05)。從細(xì)胞免疫化學(xué)實(shí)驗(yàn)中觀察到，對(duì)照組NGF、IGF-1陽(yáng)性表達(dá)主要見(jiàn)于胞漿區(qū)。高糖組NGF、IGF-1陽(yáng)性表達(dá)較對(duì)照組明顯降低。與高糖組相比，馬錢(qián)苷（5μg·mL-1、10μg·mL-1、20μg·mL-1、40μg·mL-1）NGF、IGF-1陽(yáng)性表達(dá)均有不同程度的增高，其中馬錢(qián)苷

6、（20μg·mL-1、40μg·mL-1）NGF、IGF-1陽(yáng)性表達(dá)最明顯（P＜0.05）。與高糖組相比，芍藥苷（12μg·mL-1、24μg·mL-1）NGF、IGF-1陽(yáng)性表達(dá)增高（P＜0.05），而芍藥苷（3μg·mL-1、6μg·mL-1）NGF、IGF-1陽(yáng)性表達(dá)不明顯(P＞0.05)。
　　結(jié)論:1.高糖對(duì)雪旺細(xì)胞的增殖有明顯抑制作用，且隨著葡萄糖濃度的增高，抑制越明顯。2.高糖使雪旺細(xì)胞下調(diào)NGF、IGF-1基因與蛋