TNF-α對COPD營養(yǎng)不良大鼠模型呼吸肌蛋白質(zhì)分解代謝的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:建立COPD大鼠模型,觀察大鼠營養(yǎng)狀態(tài)和呼吸肌蛋白質(zhì)分解代謝率的變化,觀察血清TNF-a的變化及與營養(yǎng)狀態(tài)的關(guān)系、呼吸肌組織TNF-a的變化及與呼吸肌蛋白質(zhì)分解代謝率的關(guān)系;對部分發(fā)生營養(yǎng)不良的大鼠采用腫瘤壞死因子-a單克隆抗體(TNF-aMcAb)靜脈注射進(jìn)行干預(yù),觀察上述指標(biāo)的變化,明確TNF-a是否對COPD模型大鼠的營養(yǎng)狀態(tài)和呼吸肌蛋白質(zhì)分解代謝率有影響。 方法:將90只健康Wistar大鼠隨機(jī)分為模型組70只

2、,對照組20只。模型組采用氣管內(nèi)注入豬胰彈性蛋白酶(PPE)和熏香煙的方法建立COPD大鼠模型。對照組不熏香煙,在模型組氣管內(nèi)注入PPE的同一天采用同一術(shù)式在氣管內(nèi)注入等量注射用生理鹽水。模型制作成功后,以低于對照組大鼠平均體重的90%作為判斷發(fā)生營養(yǎng)不良的標(biāo)準(zhǔn),當(dāng)COPD大鼠模型組營養(yǎng)不良發(fā)生率達(dá)到29%時,隨機(jī)抽取已發(fā)生營養(yǎng)不良的大鼠10只,將動物分為對照組、COPD模型營養(yǎng)正常組、COPD模型營養(yǎng)不良非干預(yù)組和COPD模型營養(yǎng)不良

3、TNF-A McAb干預(yù)組。COPD模型營養(yǎng)不良TNF-A McAb干預(yù)組尾靜脈注射TNF-A McAb 0.1mg/Kg.Bw,其他組動物在相同時間尾靜脈注射等量注射用生理鹽水,干預(yù)4天,繼續(xù)飼養(yǎng)10天后,處死全部大鼠,進(jìn)行如下指標(biāo)測定: 1)采用酶聯(lián)免疫吸附實驗(ElLISA)測定大鼠血清、呼吸肌勻漿TNF-a 含量。 2)使用自動生化儀測定大鼠血漿葡萄糖、白蛋白、甘油三酯含量。 3)分離大鼠膈肌、肋間內(nèi)肌,

4、分別稱重,勻漿后取上清液,采用高效液相色譜法(HPLC)測定上清液中三甲基組氨酸(3-MH)、酪氨酸(Tyr)含量。 結(jié)果: 1)大鼠血清腫瘤壞死因子-α測定結(jié)果:COPD模型營養(yǎng)不良非干預(yù)組血清TNF-α含量明顯高于對照組(P<0.01)、COPD模型營養(yǎng)正常組(P<0.01)和COPD模型營養(yǎng)不良干預(yù)組(P<0.01);COPD模型營養(yǎng)正常組血清TNF-α含量明顯高于對照組(P<0.01)。 2)血漿葡萄糖、

5、白蛋白、甘油三酯含量測定:COPD模型營養(yǎng)不良非干預(yù)組血漿葡萄糖、甘油三酯含量明顯高于對照組(P<0.01,P<0.01)、COPD模型營養(yǎng)正常組(P<0.01,P<0.01)和COPD模型營養(yǎng)不良干預(yù)組(P<0.01,P<0.01);COPD模型營養(yǎng)不良非干預(yù)組血漿白蛋白含量明顯低于對照組(P<0.01)、COPD模型營養(yǎng)正常組(P<0.01)和COPD模型營養(yǎng)不良干預(yù)組(P<0.01);COPD模型營養(yǎng)正常組血漿葡萄糖、甘油三酯含量

6、明顯高于對照組(P<0.01,P<0.01),COPD模型營養(yǎng)正常組血漿白蛋白含量則明顯低于對照組(P<0.01)。 3)大鼠呼吸肌腫瘤壞死因子-α測定結(jié)果:COPD模型營養(yǎng)不良非干預(yù)組呼吸肌勻漿TNF-α含量明顯高于對照組(P<0.01,P<0.01)、COPD模型營養(yǎng)正常組(P<0.01,P<0.01)和COPD模型營養(yǎng)不良干預(yù)組(P<0.01,P<0.01);COPD模型營養(yǎng)正常組呼吸肌勻漿TNF-Q含量明顯高于對照組(P

7、<0.01,P<0.01)。 4)大鼠膈肌稱重結(jié)果:COPD模型營養(yǎng)不良非干預(yù)組大鼠膈肌重量明顯低于對照組(P<0.01)、COPD模型營養(yǎng)正常組(P<0.01)和COPD模型營養(yǎng)不良干預(yù)組(P<0.01);COPD模型營養(yǎng)正常組膈肌重量明顯低于對照組(P<0.01)。 5)大鼠膈肌、肋間內(nèi)肌勻漿中三甲基組氨酸(3-MH)、酪氨酸(Tyr)含量測定結(jié)果:COPD模型營養(yǎng)不良組大鼠膈肌、肋間內(nèi)肌勻漿中3-MH、Tyr含量均

8、明顯高于對照組(P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01)、COPD模型營養(yǎng)正常組(P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01)和COPD模型營養(yǎng)不良干預(yù)組(P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01);COPD模型營養(yǎng)正常組膈肌、肋間內(nèi)肌勻漿中3-MH、Tyr含量均明顯高于對照組(P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01)。 6)COPD模型營養(yǎng)不良TNF-α McAb干預(yù)組

9、干預(yù)后第十天,部分大鼠體重恢復(fù)到對照組平均體重的90%以上。血漿葡萄糖、白蛋白、甘油三酯與COPD營養(yǎng)正常組相比無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05,P>0.05,P>0.05);膈肌重量與COPD營養(yǎng)正常組相比無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05);膈肌、肋間內(nèi)肌3-MH、Tyr含量與COPD營養(yǎng)正常組相比無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05,P>0.05,P>0.05,P>0.05)。 結(jié)論:TNF-α參與了COPD大鼠模型營養(yǎng)不良的發(fā)生。COPD大鼠模

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