運動性疲勞對大鼠骨骼肌蛋白質組表達譜影響的研究.pdf

1、分析運動疲勞對大鼠大腿骨骼肌蛋白組表達譜的影響，尋找新的與運動疲勞相關的蛋白質，以期對運動疲勞的產生機制作進一步的探討。 方法： 本研究采用比較蛋白質組學方法，研究運動疲勞對大鼠后肢大腿骨骼肌蛋白質組表達譜的影響。以游泳方式建立大鼠運動疲勞模型，利用動物行為學和生物化學方法對模型的可信度進行驗證。 建模結束后，研磨法提取蛋白質，用Lowry法測定蛋白總量，進行二維電泳分離，通過計算機圖像分析，尋找差異性蛋白質，將

2、差異性蛋白質點分別進行質譜分析，經數據庫查詢，初步鑒定出這些差異蛋白。 研究結果： 1．利用動物行為學和生物化學方法對運動模型進行觀察、檢測。發(fā)現(xiàn)大鼠神情倦怠，雙眼暗淡無光，皮毛蓬亂枯槁，片狀脫落，食欲下降，對外界刺激反應遲鈍，逃避和探究行為減少，運動能力下降，體重減輕，第7天和第10天較對照組明顯下降，存在顯著性差異。大鼠血尿素含量即刻組和12小時組與對照組相比增高，存在差異。 結果提示：大鼠十天遞增負荷游泳運

3、動造成的動物疲勞狀態(tài)與運動員生化指標變化基本相似，說明本實驗提供的動物模型是可靠的。 2．經二維電泳分離，以及計算機圖像分析，發(fā)現(xiàn)：在實驗組有12個蛋白發(fā)生明顯的變化(蛋白質濃度相差3倍以上)，其中9個蛋白質表達下調，3個蛋白質表達上調。 3．經質譜分析，數據庫查詢，初步鑒定出這些差異蛋白： (1)3個表達上調的蛋白質中有兩個是同一個蛋白質--肌球蛋白巰解輕鏈，另一個是肌球蛋白輕鏈1，都屬于肌球蛋白輕鏈；

4、 (2)9個表達下調的蛋白質：三磷酸甘油醛脫氫酶，β-烯醇化酶，肌酸激酶M鏈，ATP-AMP轉化酶，肌球蛋白重鏈，肌動蛋白，快速骨骼肌型肌鈣蛋白I，快速骨骼肌型肌鈣蛋白T，未知蛋白RIKEN cDNA 1700001F09[Mus musculus]。 結論： 1、十天遞增負荷游泳運動所建的運動疲勞模型，動物行為學特征和生化指標與運動員在運動中出現(xiàn)的運動疲勞狀態(tài)時的特征相吻合，說明本實驗所建立的運動疲勞模型是可靠的。

5、 2、表達下調的蛋白質中，4個酶(GAPDH；M-CK；Beta enolase；ATP-AMP轉化酶)與運動疲勞時骨骼肌能量代謝失衡，代謝產物堆積以及機體的調節(jié)失衡有關。4個是骨骼肌收縮蛋白(MHC；actin；fsTnl；TnTF)，可能是長時間劇烈運動導致骨骼肌蛋白質降解增加。另外一個是RIKEN cDNA 1700001F09是新蛋白，目前尚未報道。表達上調的蛋白質(MLC<,1>、DTNB)，可能與運動疲勞時機體酸性代謝產