褐飛虱細胞色素單加氧酶基因的功能分析.pdf

1、細胞色素單加氧酶(P450)酶系又稱作多功能氧化酶(MFO)，是一類代謝酶并且廣泛存在于所有需氧生物體，它可以催化和調控內源物質和外源物質的代謝與轉化。在昆蟲中約有100個左右的P450基因，它們的作用廣泛，昆蟲對殺蟲劑有抗藥性和對植物有毒物質有耐受性是因為P450基因能對異源物質有代謝作用。此外P450還參與了昆蟲體內兩大激素保幼激素、蛻皮激素的合成與代謝。
　　本研究以褐飛虱作為研究對象，通過篩選基因組及轉錄組，共鑒定到68條

2、P450序列。著重對CYP2亞家族進行了功能分析。實時熒光定量PCR結果顯示CYP18A1、CYP304H1基因在褐飛虱的整個若蟲期內均有表達，且表達量隨齡期逐漸升高，但CYP303A1基因則與前兩個基因相反，整個若蟲期內均有表達，且表達量隨齡期逐漸降低。這三個基因在褐飛虱的成蟲體內表達量不高;CYP18A1基因在褐飛虱的翅芽中表達量最高，其次是卵巢，體壁。CYP304H1基因在褐飛虱的脂肪體中表達量最高，其次是唾液腺。CYP303A1

3、在體壁和翅芽中表達量非常高。對5齡第一天的若蟲進行顯微注射dsC YP18A1、dsCYP304H1、dsCYP303A1，mRNA可被有效下調，褐飛虱5齡若蟲的體壁以及蛻皮過程均呈現(xiàn)不同程度的畸形表型，且干擾這三個基因都會使褐飛虱致死;對這三個基因干擾分別干擾3齡、4齡、5齡的褐飛虱若蟲，統(tǒng)計三個齡期死亡率，結果顯示三個基因對褐飛虱的不同齡期均致死。通過CYP304H1轉錄組數據，克隆CYP304H1基因片段大小為522bp，可編碼含