欖香烯及eIF4E反義寡核苷酸對人食管癌EC-1細(xì)胞中eIF4E、4EBP1表達(dá)影響的研究.pdf

1、授 予 單 位 代 碼 :學(xué) 號 或 申 請 號 :密 級 :10 4 5 9. 2 0 0 6 1. 2 0 2 6 10 0 10 4 0 1Q 一-公 開 _ _文學(xué) 論 大 位 州 學(xué) 鄭 士碩(科 學(xué) 學(xué)位 )欖 香烯 及 e工 F4E 反義寡核昔酸對人食 管癌 EC - 1 細(xì)胞 中eIF4E 、4EBP I 表 達(dá) 影 響 的研 究院 系 名 稱 : 基礎(chǔ) 醫(yī)學(xué) 院學(xué) 科 門 類 : 醫(yī) 學(xué)專 業(yè) 名 稱 : 病理 學(xué)與病

2、 理生理學(xué)作 者 姓 名 : 王志永導(dǎo)師姓 名 、職 稱 : 張 紅 教授 陳奎 生 教授二 零 零 九 年 五 月鄭州大學(xué) 20 09 屆碩士研 究生畢業(yè) 論文 欖香烯及 e IF 4E 反義寡核昔酸對人食管癌 EC一 l 細(xì)胞 中 e IF4 E、4E B P I 表達(dá)影響的研究用 ，以 eIF4E 為靶點(diǎn)的抗腫瘤治療 的研究 已引起人們 的關(guān)注 。Son i 等人研究發(fā)現(xiàn) ，在乳腺癌 中抑制 eIF4E 的表達(dá) 能有效抑制腫瘤 的

3、生長 ，同時(shí)檢測發(fā)現(xiàn) 4EBPI的表達(dá) 降低 。而在食管癌 中有關(guān)影響 eIF4E 、4EBPI 表達(dá) 的研究 尚未見有報(bào) 道 。反義寡核普 酸 (antisens。。 ligonucleotide，ASON)是指 能與靶 DNA 或 RNA以堿基配對 的原則相 結(jié)合 的一小段核昔酸序 列 。ASON 與靶 mR NA 上特 定序列 結(jié)合后 能有 效抑 制 或 阻斷 mRNA 的表達(dá) ，因此 ，反義技術(shù)近年來 己成 為抗腫瘤領(lǐng)域研究 的

4、熱 點(diǎn) 。欖 香烯 (E lemene )是從 中藥溫羲術(shù) 中提取 的一種有 效成分 ，化 學(xué)名為 1一 甲基一 1一 乙烯 基一 2， 4一 二異 丙基環(huán) 已烷， 具有抗腫瘤 作用 強(qiáng) 、毒 副作用 小等特 點(diǎn) 。欖 香烯 已應(yīng)用 于臨床 并有 顯著 的抗腫瘤作用 ，但其 具體 的抗腫 瘤機(jī)制 尚不清 楚 。本研 究 以人食 管癌 EC吸 細(xì)胞 為研 究對象 ，探求 eI F4E 反義寡核昔酸和欖 香烯 對人食管癌細(xì)胞 中 eI F4

5、E 、4EBPI 表達(dá) 的影 響 ，為食 管癌 的臨床 治療提供 理論依 據(jù) 。材 料 與方 法1. 人 食 管癌 EC一 細(xì) 胞 由香港 大 學(xué) 曹世 華 教授 惠贈(zèng) 。2 . 食 管癌 EC一 1 細(xì) 胞 的培養(yǎng) : 食 管癌 EC一 1 細(xì)胞 以 10% 胎 牛血清 培養(yǎng)液 (含青 、鏈 霉 素各 loo u/ml )在 37 ℃、5%COZ條 件 下 貼 壁培養(yǎng) 。3. 轉(zhuǎn) 染 : 應(yīng) 用 Li po fus inx 脂質(zhì) 體將

6、 AS ODN s 轉(zhuǎn) 染 食 管癌 EC一 l 細(xì)胞 。4 . 應(yīng)用 免疫細(xì)胞化 學(xué) SP 法檢測 各實(shí)驗(yàn) 組 、 對 照組 中 eI F4E 和 4EBPI 蛋 白的表達(dá)情況 。5 . 應(yīng)用 細(xì)胞 原位 雜交技術(shù)檢測各 實(shí)驗(yàn) 組 、對照 組 中 。 IF4E 和 4EBPImR NA 的表 達(dá) 清 況 。6 . 統(tǒng) 計(jì)學(xué)處理 : 采用 SPSS10.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析 。計(jì)量 資料用均數(shù) 士標(biāo)準(zhǔn) 差 (又 士S) 表 示 ，兩 組