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文檔簡介
1、第一部分穴位處鈣離子的分布特性及針刺對俞穴處pH值的影響 實驗一山羊膀胱經(jīng)上Ca2+分布特性的實驗研究 目的:探討鈣離子與經(jīng)絡(luò)現(xiàn)象之間的聯(lián)系。 方法:選擇健康雜交母山羊,采用新型Ca2+生物傳感針,實時、動態(tài)觀測Ca2+在山羊膀胱經(jīng)上俞穴(“肝俞”,“后三里”)以及相應(yīng)非經(jīng)非穴上的分布特性。 結(jié)果:山羊膀胱經(jīng)上俞穴的鈣離子濃度(“肝俞”-42.73±7.83mv,“大腸俞”-38.73±8.16mv,“關(guān)
2、元俞”-44.43±8.19mv,)明顯高于旁開對照點(diǎn)(“肝俞”旁開-51.45±6.91mv,“大腸俞”旁開-50.51±7.62mv,“關(guān)元俞”旁開-53.36±9.09mv),提示循經(jīng)脈線上有鈣離子富集現(xiàn)象。 結(jié)論:鈣離子可能是針刺信號傳導(dǎo)的關(guān)鍵因素,其濃度的測定有可能作為鑒別俞穴的重要理化指標(biāo)。 實驗二針刺對山羊俞穴pH值的影響 目的:探討針刺對俞穴和非經(jīng)穴位pH值的影響。 方法:選擇健康雜交母山
3、羊,用針型pH生物傳感針單獨(dú)和同時針刺檢測山羊膀胱經(jīng)上“肝俞”及其旁開非經(jīng)穴處,“后三里”及其旁開非經(jīng)穴處pH值的變化。 結(jié)果: 1單獨(dú)針刺時穴位和非經(jīng)穴位的pH值都下降,穴位(“肝俞”下降15.73±4.09mv,“后三里”下降17.50±4.04mv)比非穴位(“肝俞”旁2cm下降10.68±5.22mv,“后三里”旁2cm下降13.11±2.82mv)下降的更明顯,二者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義; 2同時針刺穴位
4、和非經(jīng)穴位時,二者pH值下降的幅度沒有統(tǒng)計學(xué)上的差別。 結(jié)論: 1針刺使穴位處pH值降低和代謝增強(qiáng)更明顯; 2同時針刺時局部代謝可能相互影響。 第二部分針刺對局部腦缺血大鼠VEGF表達(dá)和腦血流的影響 目的:觀察針刺對腦缺血區(qū)血流,血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的表達(dá)和細(xì)胞增殖情況的影響,為針刺對腦缺血保護(hù)作用的機(jī)制研究提供實驗依據(jù)。 方法: 1.動物造模、分組和處理 選用健康
5、雄性SD大鼠36只,200g-250g,清潔級,隨機(jī)分為正常組、模型組和針刺組每組12只。其中正常組不予任何處理,模型組制作腦缺血模型后不予任何治療,針刺組在腦缺血后2h即開始針刺治療,15min/次/天,在缺血2h,26h,50h共治療3次。(SD大鼠由華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院實驗動物中心提供)?;⒓tB(四碘四氯熒光素二鈉)作光敏劑,光化學(xué)法制作腦缺血模型。 2.血流檢測方法 動物頭頂部矢狀切口,于前囟后2mm,中線左0
6、.5mm(A點(diǎn)),3mm(B點(diǎn)),5mm(C點(diǎn))處鉆直徑1mm的小孔,激光多譜勒探頭固定在腦立體定位儀上調(diào)整使之接觸腦皮質(zhì)來檢測血流。A點(diǎn)為正常腦區(qū),B點(diǎn)為腦梗死區(qū),C點(diǎn)為梗死邊緣區(qū),檢測時間為缺血2h第一次針刺前和缺血72小時后,每次檢測5分鐘。 3.血管內(nèi)皮生長因子和細(xì)胞增殖檢測 于造模72h后將一半動物斷頭處死,迅速取腦,并取梗死周邊區(qū)及梗死區(qū)組織行RT-PCR檢測VEGFmRNA.,另一半動物用多聚甲醛灌注固定后
7、,取腦視交叉后2-4mm處做連續(xù)冠狀切片以免疫組織化學(xué)方法檢測VEGF表達(dá)和細(xì)胞增殖。 結(jié)果: 1.正常組大鼠腦血流在72h前后基本沒有改變,模型組和針刺組動物的腦血流,A點(diǎn)正常腦區(qū)在三天前后也沒有統(tǒng)計學(xué)意義上的改變,模型組和針刺組B點(diǎn)梗死區(qū)造模2h后與正常組相比血流值明顯下降,三天前后血流值雖然有所波動,但自身配對t檢驗沒有統(tǒng)計學(xué)意義。模型組C點(diǎn)梗死邊緣區(qū)在造模2h后血流下降但是沒有B點(diǎn)明顯,三天后血流值繼續(xù)下降,針刺
8、組C點(diǎn)造模2h后血流值也下降,但是三天后血流值比缺血2h要高,二者相比有統(tǒng)計學(xué)意義。 2.模型組腦梗死邊緣區(qū)VEGFmRNA的表達(dá)量高于正常組但無統(tǒng)計學(xué)意義,針刺組VEGFmRNA表達(dá)高于模型組,二者相比有統(tǒng)計學(xué)意義。 3.模型組和針刺組的VEGF和Ki67陽性表達(dá)均比正常組增高,而針刺組的VEGF和Ki67陽性表達(dá)比模型組高,且二者相比有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)論: 1.缺血后給予針刺治療能改善缺血周邊區(qū)腦血流
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