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文檔簡介
1、目的：研究單核細胞趨化蛋白-1（MCP-1）誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細胞凋亡的途徑。方法：1.培養(yǎng)并鑒定人臍靜脈內(nèi)皮細胞；2.不同濃度的MCP-1（0.1ng/mL，1.0ng/mL，10ng/mL，100ng/mL）作用hVECs48h后，NAO染色流式細胞術(shù)檢測線粒體質(zhì)量；流式細胞術(shù)檢測細胞色素C（Cyt C）含量變化；Western blot檢測Caspase-9蛋白的表達；3.用不同濃度MCP-1（0.1ng/mL，1.0ng/mL，1
2、0ng/mL，100ng/mL）作用細胞48h，Real-time PCR檢測細胞P53mRNA表達量；Westernblot檢測p53蛋白的表達；用不同劑量（10μ mol/L，20μ mol/L，30μ mol/L）的P53阻斷劑PFT-α預(yù)處理細胞后，再用10ng/mL的MCP-1誘導(dǎo)hVECs，AnnexinV-FITC/PI雙染細胞流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡率。結(jié)果：1.成功培養(yǎng)了人臍靜脈內(nèi)皮細胞，經(jīng)免疫熒光法鑒定為內(nèi)皮細胞。2.
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