膿毒癥大鼠腸道HMGB1的變化及丙酮酸乙酯的保護(hù)作用.pdf

1、目的：構(gòu)建膿毒癥大鼠腸道損傷模型，研究HMGB1在膿毒癥大鼠腸道損傷中的作用及表達(dá)規(guī)律，探討丙酮酸乙酯對(duì)膿毒癥腸道損傷保護(hù)作用的機(jī)制。
　　方法：60只清潔級(jí)雄性SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組（S組）、膿毒癥組（C組）和丙酮酸乙酯治療組（M組）。采用盲腸結(jié)扎穿孔方法復(fù)制膿毒癥腸道損傷模型，M組于術(shù)后即刻腹腔注射丙酮酸乙酯溶液（40mg/kg），S組及C組腹腔注射等量乳酸鈉林格氏液。術(shù)后3h、6h、12h、24h從各實(shí)驗(yàn)組取5只大鼠，顯微

2、鏡下觀察腸道損傷情況，并進(jìn)行病理評(píng)分；應(yīng)用分光光度法測(cè)定血漿二胺氧化酶(DAO)及D-乳酸含量；采用RT-PCR法檢測(cè)HMGB1 mRNA表達(dá)，應(yīng)用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)小腸組織HMGB1蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果：1.腸道病理?yè)p傷情況：S組各時(shí)間點(diǎn)未見(jiàn)明顯腸道損傷，小腸組織病理評(píng)分無(wú)顯著差別，C組及M組在12h、24h可見(jiàn)明顯腸道損傷，且兩組的小腸組織病理評(píng)分隨術(shù)后時(shí)間延長(zhǎng)呈升高趨勢(shì)。C組小腸組織病理評(píng)分在6h、12h、24h時(shí)間點(diǎn)均高于

3、S組，M組在12h、24h時(shí)間點(diǎn)高于S組（P<0.05）。與C組相比，M組小腸組織病理評(píng)分在24h顯著改善（P<0.05）。
　　2.血漿DAO及D-乳酸含量：S組各時(shí)間點(diǎn)血漿DAO及D-乳酸含量無(wú)明顯差別，C組及M組血漿DAO及D-乳酸含量隨時(shí)間的推移呈增高趨勢(shì)，且在各時(shí)間點(diǎn)均高于S組（P<0.05）。M組在6h、12h、24h的血漿DAO及D-乳酸含量明顯低于C組（P<0.05）。
　　3.小腸組織HMGB1 mRNA表

4、達(dá)：S組小腸組織各時(shí)間點(diǎn)HMGB1 mRNA表達(dá)無(wú)明顯差別，C組及M組小腸組織HMGB1 mRNA表達(dá)伴隨時(shí)間的增加逐漸升高，在6h、12h、24h均高于S組（P<0.05）。M組小腸組織HMGB1 mRNA表達(dá)在6h、12h、24h點(diǎn)均低于C組（P<0.05）。
　　4.小腸組織HMGB1蛋白表達(dá)：S組小腸組織HMGB1表達(dá)在各時(shí)間點(diǎn)無(wú)明顯差別（P>0.05），HMGB1在C組及 M組小腸組織的表達(dá)隨時(shí)間增加逐漸升高，但M組在2

5、4h升高不顯著。C組及M組在6h、12h、24h HMGB1表達(dá)均高于S組（P<0.05）。與C組相比，M組小腸組織的HMGB1表達(dá)于12h、24h顯著減少（P<0.05）。
　　5.小腸組織HMGB1蛋白表達(dá)與病理評(píng)分相關(guān)性分析：小腸組織HMGB1蛋白表達(dá)與病理評(píng)分在6h、12h、24h時(shí)間點(diǎn)存在顯著相關(guān)性，其相關(guān)系數(shù)分別為0.740、0.614、0.905（P<0.05）。
　　結(jié)論：膿毒癥大鼠腸道損傷程度與腸組織HMG