富硒鋅益生菌制劑研制及其在犬上的初步應(yīng)用.pdf

1、硒和鋅是人和動(dòng)物所必需的微量元素，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)它們具有一系列重要的生物學(xué)功能。硒功能包括：提高機(jī)體免疫力、抗癌、抗自由基、延緩衰老、拮抗有毒元素、防治某些地方性流行病等.鋅由于其在體內(nèi)廣泛的生理生化功能而被稱為“生命元素”。其功能包括：促進(jìn)機(jī)體發(fā)育和骨骼生長、提高免疫機(jī)能、提高動(dòng)物的繁殖機(jī)能、參與蛋白質(zhì)和核酸代謝，調(diào)節(jié)酶的活性等。近十幾年來，用微生物作為載體富集人和動(dòng)物所必需的微量元素以獲得有機(jī)態(tài)、成本低廉的微量元素添加劑日益引起了各國的關(guān)

2、注。有機(jī)硒和有機(jī)鋅與無機(jī)硒和無機(jī)鋅相比有許多優(yōu)勢，首先其毒性較小，適口性好，此外因其吸收利用率更高，可降低飼料中硒和鋅的添加量，從而減少對(duì)環(huán)境的污染。酵母菌具有富集多種微量元素的能力，又是發(fā)酵工業(yè)中最常用的菌種之一，其他微生物(如乳酸菌等益生菌)也有一定的富集微量元素的能力。一些人用及飼用微生物富集的有機(jī)微量元素產(chǎn)品相繼問世。本研究試圖通過篩選益生菌菌株，優(yōu)化培養(yǎng)條件，研制成一種具有有機(jī)硒、有機(jī)鋅和益生菌三重作用的富硒鋅益生菌制劑，在此

3、基礎(chǔ)上對(duì)犬的全血硒鋅含量、抗氧功能和腸道菌群影響作了初步探索。 1.富硒鋅益生菌菌株的篩選 本試驗(yàn)對(duì)3株酵母菌和5株乳酸菌進(jìn)行篩選.在添加不同Se4+含量的瓊脂平皿培養(yǎng)基中分別接種酵母菌和乳酸菌進(jìn)行了耐硒能力試驗(yàn)，然后在添加不同Zn2+含量的瓊脂平皿培養(yǎng)基中分別接種酵母菌和乳酸菌進(jìn)行耐鋅能力試驗(yàn)，綜合篩選出Y2和L4為耐硒和耐鋅能力強(qiáng)的菌株。 2.富硒鋅益生菌培養(yǎng)條件的優(yōu)化 利用產(chǎn)朊假絲酵母和嗜酸乳桿菌作

4、菌種，在培養(yǎng)基中添加一定量的2n2+和Se4+，采用混合發(fā)酵法生產(chǎn)富硒鋅益生菌，并對(duì)富硒鋅益生菌培養(yǎng)條件進(jìn)行的優(yōu)化，經(jīng)過篩選，富硒鋅益生菌的培養(yǎng)條件：培養(yǎng)基為適宜的培養(yǎng)基，裝液量50ml/250ml三角瓶，5μgml/L的Se4+濃度，150μgml/L的Zn2+濃度，5％的接種量，32℃，培養(yǎng)時(shí)間為36h。在優(yōu)化的培養(yǎng)條件下，混合培養(yǎng)，培養(yǎng)結(jié)束后，低溫下3000r·min-1離心20min，得到菌泥，菌泥中加入保護(hù)劑(保護(hù)劑為脫脂奶粉

5、和蔗糖)，真空冷凍干燥，得到富硒鋅益生菌產(chǎn)品，獲得富硒鋅益生菌的量為25.94g·L-1，硒含量為167.23μg·g-1，鋅含量為4.52mg·g-1，產(chǎn)朊假絲酵母的數(shù)量為1.02×108cfu·g-1，嗜酸乳桿菌的數(shù)量為1.48×109cfu·g-1。 3.富硒鋅益生菌對(duì)犬全血硒鋅含量、抗氧化功能和腸道菌群的影響 研究富硒鋅益生菌對(duì)犬全血硒鋅含量、抗氧化能力和腸道菌群的影響。8條18月齡本地犬，雌雄各半，均分成對(duì)照組

6、和試驗(yàn)組.對(duì)照組在整個(gè)試驗(yàn)期間飼喂犬基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)組在飼喂犬基礎(chǔ)日糧的基礎(chǔ)上，每天補(bǔ)給富硒鋅益生菌2.0g，連續(xù)30 d。分別于飼喂的第0d、15 d和30 d采樣測定全血硒鋅含量與抗氧化能力和腸道菌群的相關(guān)指標(biāo)。結(jié)果：在試驗(yàn)15d，犬全血硒和鋅含量、全血GPX活性、血清SOD活性、血清T-AOC和糞中乳桿菌數(shù)量顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，糞中腸桿菌數(shù)量顯著低于對(duì)照組(P<0.05)，血清MDA含量和糞中雙歧桿菌、葡萄球菌和腸球菌數(shù)

7、量與對(duì)照組之間差異不顯著(P>0.05)；在試驗(yàn)30 d，犬全血硒含量、血清SOD活性、血清T-AOC和糞中乳桿菌數(shù)量極顯著高于對(duì)照組(P<0.01)，全血鋅含量、GPX活性和糞中雙歧桿菌數(shù)量顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，糞中腸桿菌數(shù)量極顯著低于對(duì)照組(P<0.01)，血清MDA含量、糞中葡萄球菌和腸球菌數(shù)量顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。 結(jié)論：富硒鋅益生菌能提高犬全血硒和鋅含量，提高機(jī)體抗氧化能力，調(diào)節(jié)腸道菌群和改善腸道內(nèi)