二十二碳六烯酸和亞油酸對(duì)牛體內(nèi)共軛亞油酸前體物累積的影響.pdf

1、本研究通過3個(gè)試驗(yàn)，探討了二十二碳六烯酸(DHA)和亞油酸(LA)對(duì)共軛亞油酸(CLA)生物合成前體物trans11油酸(TVA)在胃腸道累積的規(guī)律及機(jī)制，為生產(chǎn)高檔反芻動(dòng)物產(chǎn)品提供技術(shù)儲(chǔ)備和理論基礎(chǔ)。 試驗(yàn)一：本試驗(yàn)旨在采用實(shí)時(shí)定量PCR法研究肉牛采食高粗日糧前后瘤胃細(xì)菌數(shù)量的變化，并探討細(xì)菌數(shù)量與瘤胃發(fā)酵參數(shù)之間的關(guān)系。采用4頭帶有永久性瘤胃瘺管肉牛作為試驗(yàn)動(dòng)物，飼喂精粗比為35:65的試驗(yàn)日糧，試驗(yàn)期為28d。在試驗(yàn)第26

2、、27、28d飼喂前07:30(飼喂前)和11:30與17:30(飼喂后)采集瘤胃液，通過實(shí)時(shí)定量PCR方法檢測(cè)采食前后瘤胃細(xì)菌數(shù)量的變化，并構(gòu)建細(xì)菌數(shù)量與瘤胃發(fā)酵參數(shù)之間的回歸關(guān)系。 試驗(yàn)結(jié)果表明，隨著動(dòng)物進(jìn)食，瘤胃pH顯著降低，到進(jìn)食后10h時(shí)，pH又恢復(fù)到進(jìn)食前水平。在高粗日糧下，瘤胃乙酸、丙酸以及乙酸與丙酸之比不隨進(jìn)食的影響而發(fā)生顯著變化(P>0.05)。 通過對(duì)細(xì)菌數(shù)量與pH以及丙酸與乙酸、丁酸之和之比進(jìn)行相關(guān)

3、性分析發(fā)現(xiàn)，F(xiàn).succinogenes、B.fibrisolvens和R.albusDNA拷貝數(shù)常用對(duì)數(shù)之和與pH存在顯著性強(qiáng)相關(guān)(R2=0.49；P<0.05)，但與丙酸與乙酸、丁酸之和之比相關(guān)性較低(R2=0.25；P>0.05)?？傊?，實(shí)時(shí)定量PCR具有準(zhǔn)確、快速地監(jiān)測(cè)瘤胃細(xì)菌數(shù)量的變化；不同細(xì)菌在采食前后數(shù)量存在著不同的變化；瘤胃pH值較VFA對(duì)細(xì)菌數(shù)量的變化更敏感。 試驗(yàn)二：本研究目的在于通過日糧添加不同水平組合的魚

4、油與葵花油，探討油脂對(duì)肉牛瘤胃細(xì)菌數(shù)量以及瘤胃液、細(xì)菌、血液中TVA變化、腸道TVA流量和魚油(富含DHA)對(duì)葵花油(富含LA)代謝的影響。 試驗(yàn)采用4頭帶有永久性瘤胃、十二指腸和回腸瘺管的肉牛，按4×4拉丁方試驗(yàn)設(shè)計(jì)分配到4個(gè)處理組中。日糧精粗比為35:65，日糧處理分別為對(duì)照日糧(CK)，對(duì)照日糧加3.0％葵花油和1.0％魚油(S3F1)，或2.5％葵花油和1.5％魚油(S2.5F1.5)以及2.0％葵花油和2.0％魚油(S

5、2F2)，每期試驗(yàn)維持21d。試驗(yàn)結(jié)果表明，與對(duì)照組相比，S3F1、S2.5F1.5、S2F2組中F.succinogenesDNA拷貝數(shù)分別降低48％、70％和74％，差異顯著(P<0.05)；S3F1、S2.5F1.5、S2F2中B.fibrisolvensDNA拷貝數(shù)較對(duì)照組分別下降了22.44％、13.18％和38.72％；油脂添加對(duì)R.flavefaciens和R.albus影響較小。 日糧添加油脂顯著增加了瘤胃液中T

6、VA和cis9,trans11CLA含量，但不同油脂組合之間差異不顯著。就瘤胃混合細(xì)菌脂質(zhì)組成而言，油脂添加增加了細(xì)菌脂質(zhì)中TVA含量(P<0.05)，但對(duì)cis9,trans11CLA含量無顯著影響。十二指腸細(xì)菌中cis9,trans11CLA含量遠(yuǎn)低于瘤胃細(xì)菌中含量(P<0.01)。當(dāng)添加油脂時(shí)，十二指腸TVA流量顯著增加(油脂組平均TVA含量較CK組增加了近270％)，而各油脂組之間差異不顯著。 同時(shí)，油脂的添加顯著降低了

7、十二指腸內(nèi)C18:0流量。此外，添加油脂提高了血漿中TVA含量，但在所有處理組血漿中均未檢測(cè)到cis9,trans11CLA?？傊?，日糧多不飽和脂肪酸(PUFA)對(duì)瘤胃不同細(xì)菌的生長(zhǎng)有不同影響。隨著PUFA的添加，瘤胃細(xì)菌脂質(zhì)組成發(fā)生改變，且十二指腸TVA流量增加；同時(shí)，LA的瘤胃氫化受魚油添加劑量的影響。 試驗(yàn)三：本研究目的在于通過日糧添加DHA和游離LA，探討二者互作對(duì)奶牛胃腸道中CLA和TVA合成代謝和氫化細(xì)菌數(shù)量的影響。

8、試驗(yàn)采用4頭帶有永久性瘤胃、十二指腸、回腸瘺管奶牛根據(jù)4×4拉丁方試驗(yàn)設(shè)計(jì)模型分配到4個(gè)處理組中。 日糧精粗比為40:60，日糧處理分別為對(duì)照日糧(CK)，對(duì)照日糧加2.73％游離LA(RFLA)或加0.5％DHA(RFDA)以及加2.73％LA和0.5％DHA(RFLDA)。每期試驗(yàn)維持21d，在每期試驗(yàn)的第15d采集瘤胃液，第16、17和18d采集瘤胃、十二指腸、回腸和糞樣食糜，第17和18d采集奶樣，第21d采集血液。

9、 試驗(yàn)結(jié)果表明，日糧中DHA和LA添加并不影響瘤胃液中乙酸和丙酸等VFA含量，但二者結(jié)合時(shí)可顯著降低乙酸與丙酸之比。LA添加促進(jìn)B.fibrisolvensA38生長(zhǎng)；LA和DHA單獨(dú)或組合添加均增加了M.elsdeniistrainYJ-4生長(zhǎng)，抑制B.hungateiJK684與B.hungateiSu6生長(zhǎng)，利于TVA的累積；對(duì)R.flavefaciens無影響。 RFLDA組十二指腸TVA流量分別較CK、RFLA和R

10、FDA提高了5.37、0.39和2.37倍。 瘤胃與十二指腸的原蟲和細(xì)菌脂質(zhì)中的TVA發(fā)生顯著變化，其中RFLDA組中TVA含量最高，同時(shí)在RFLDA組血漿中TVA含量為最高。 LA和DHA添加并不影響乳常規(guī)組成(P>0.05)，但添加DHA有降低乳脂和產(chǎn)奶量的趨勢(shì)(P>0.05)。與對(duì)照組相比，在RFLA、RFLDA和RFDA組中乳脂TVA分別提高了3.5、5.4和1.0倍；cis9,trans11CLA提高了3.09

11、、6.63和1.97倍。 綜上所述，DHA或LA通過抑制B.fibrisolvens、F.succinogenes、B.hungateiJK684、B.hungateiSu6生長(zhǎng)和促進(jìn)B.fibrisolvensA38、M.elsdeniistrainYJ-4繁殖的方式來影響LA的氫化過程，導(dǎo)致TVA大量累積。 DHA抑制LA的氫化具有劑量效應(yīng)，少量DHA不能有效抑制LA的氫化第一步，但高劑量DHA既可以抑制LA的氫化第