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文檔簡介
1、本研究通過3個試驗,探討了二十二碳六烯酸(DHA)和亞油酸(LA)對共軛亞油酸(CLA)生物合成前體物trans11油酸(TVA)在胃腸道累積的規(guī)律及機制,為生產(chǎn)高檔反芻動物產(chǎn)品提供技術儲備和理論基礎。 試驗一:本試驗旨在采用實時定量PCR法研究肉牛采食高粗日糧前后瘤胃細菌數(shù)量的變化,并探討細菌數(shù)量與瘤胃發(fā)酵參數(shù)之間的關系。采用4頭帶有永久性瘤胃瘺管肉牛作為試驗動物,飼喂精粗比為35:65的試驗日糧,試驗期為28d。在試驗第26
2、、27、28d飼喂前07:30(飼喂前)和11:30與17:30(飼喂后)采集瘤胃液,通過實時定量PCR方法檢測采食前后瘤胃細菌數(shù)量的變化,并構建細菌數(shù)量與瘤胃發(fā)酵參數(shù)之間的回歸關系。 試驗結果表明,隨著動物進食,瘤胃pH顯著降低,到進食后10h時,pH又恢復到進食前水平。在高粗日糧下,瘤胃乙酸、丙酸以及乙酸與丙酸之比不隨進食的影響而發(fā)生顯著變化(P>0.05)。 通過對細菌數(shù)量與pH以及丙酸與乙酸、丁酸之和之比進行相關
3、性分析發(fā)現(xiàn),F(xiàn).succinogenes、B.fibrisolvens和R.albusDNA拷貝數(shù)常用對數(shù)之和與pH存在顯著性強相關(R2=0.49;P<0.05),但與丙酸與乙酸、丁酸之和之比相關性較低(R2=0.25;P>0.05)??傊瑢崟r定量PCR具有準確、快速地監(jiān)測瘤胃細菌數(shù)量的變化;不同細菌在采食前后數(shù)量存在著不同的變化;瘤胃pH值較VFA對細菌數(shù)量的變化更敏感。 試驗二:本研究目的在于通過日糧添加不同水平組合的魚
4、油與葵花油,探討油脂對肉牛瘤胃細菌數(shù)量以及瘤胃液、細菌、血液中TVA變化、腸道TVA流量和魚油(富含DHA)對葵花油(富含LA)代謝的影響。 試驗采用4頭帶有永久性瘤胃、十二指腸和回腸瘺管的肉牛,按4×4拉丁方試驗設計分配到4個處理組中。日糧精粗比為35:65,日糧處理分別為對照日糧(CK),對照日糧加3.0%葵花油和1.0%魚油(S3F1),或2.5%葵花油和1.5%魚油(S2.5F1.5)以及2.0%葵花油和2.0%魚油(S
5、2F2),每期試驗維持21d。試驗結果表明,與對照組相比,S3F1、S2.5F1.5、S2F2組中F.succinogenesDNA拷貝數(shù)分別降低48%、70%和74%,差異顯著(P<0.05);S3F1、S2.5F1.5、S2F2中B.fibrisolvensDNA拷貝數(shù)較對照組分別下降了22.44%、13.18%和38.72%;油脂添加對R.flavefaciens和R.albus影響較小。 日糧添加油脂顯著增加了瘤胃液中T
6、VA和cis9,trans11CLA含量,但不同油脂組合之間差異不顯著。就瘤胃混合細菌脂質組成而言,油脂添加增加了細菌脂質中TVA含量(P<0.05),但對cis9,trans11CLA含量無顯著影響。十二指腸細菌中cis9,trans11CLA含量遠低于瘤胃細菌中含量(P<0.01)。當添加油脂時,十二指腸TVA流量顯著增加(油脂組平均TVA含量較CK組增加了近270%),而各油脂組之間差異不顯著。 同時,油脂的添加顯著降低了
7、十二指腸內C18:0流量。此外,添加油脂提高了血漿中TVA含量,但在所有處理組血漿中均未檢測到cis9,trans11CLA??傊?,日糧多不飽和脂肪酸(PUFA)對瘤胃不同細菌的生長有不同影響。隨著PUFA的添加,瘤胃細菌脂質組成發(fā)生改變,且十二指腸TVA流量增加;同時,LA的瘤胃氫化受魚油添加劑量的影響。 試驗三:本研究目的在于通過日糧添加DHA和游離LA,探討二者互作對奶牛胃腸道中CLA和TVA合成代謝和氫化細菌數(shù)量的影響。
8、試驗采用4頭帶有永久性瘤胃、十二指腸、回腸瘺管奶牛根據(jù)4×4拉丁方試驗設計模型分配到4個處理組中。 日糧精粗比為40:60,日糧處理分別為對照日糧(CK),對照日糧加2.73%游離LA(RFLA)或加0.5%DHA(RFDA)以及加2.73%LA和0.5%DHA(RFLDA)。每期試驗維持21d,在每期試驗的第15d采集瘤胃液,第16、17和18d采集瘤胃、十二指腸、回腸和糞樣食糜,第17和18d采集奶樣,第21d采集血液。
9、 試驗結果表明,日糧中DHA和LA添加并不影響瘤胃液中乙酸和丙酸等VFA含量,但二者結合時可顯著降低乙酸與丙酸之比。LA添加促進B.fibrisolvensA38生長;LA和DHA單獨或組合添加均增加了M.elsdeniistrainYJ-4生長,抑制B.hungateiJK684與B.hungateiSu6生長,利于TVA的累積;對R.flavefaciens無影響。 RFLDA組十二指腸TVA流量分別較CK、RFLA和R
10、FDA提高了5.37、0.39和2.37倍。 瘤胃與十二指腸的原蟲和細菌脂質中的TVA發(fā)生顯著變化,其中RFLDA組中TVA含量最高,同時在RFLDA組血漿中TVA含量為最高。 LA和DHA添加并不影響乳常規(guī)組成(P>0.05),但添加DHA有降低乳脂和產(chǎn)奶量的趨勢(P>0.05)。與對照組相比,在RFLA、RFLDA和RFDA組中乳脂TVA分別提高了3.5、5.4和1.0倍;cis9,trans11CLA提高了3.09
11、、6.63和1.97倍。 綜上所述,DHA或LA通過抑制B.fibrisolvens、F.succinogenes、B.hungateiJK684、B.hungateiSu6生長和促進B.fibrisolvensA38、M.elsdeniistrainYJ-4繁殖的方式來影響LA的氫化過程,導致TVA大量累積。 DHA抑制LA的氫化具有劑量效應,少量DHA不能有效抑制LA的氫化第一步,但高劑量DHA既可以抑制LA的氫化第
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