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文檔簡(jiǎn)介
1、背景與目的;宮頸癌(cervical cancer)是全球女性中僅次于乳腺癌的最常見(jiàn)的惡性婦科腫瘤.患者高發(fā)年齡呈雙峰狀,35~39歲和60~64歲.據(jù)國(guó)際癌癥中心估計(jì),每年新發(fā)病例約37萬(wàn),占所有腫瘤的9.8﹪,且年輕患者有上升趨勢(shì).宮頸癌有較長(zhǎng)的癌前病變階段,其病因尚未完全明了,國(guó)內(nèi)外資料認(rèn)為其發(fā)病與過(guò)早性生活、性生活紊亂、早年分娩、密產(chǎn)多產(chǎn)、HPV感染、經(jīng)濟(jì)狀況等有關(guān). 腫瘤血管生成(tumor angiogenesis)
2、理論認(rèn)為腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移依賴于腫瘤血管生成,腫瘤細(xì)胞代謝產(chǎn)生的化學(xué)信號(hào)可激活處于休眠狀態(tài)的血管內(nèi)皮細(xì)胞從而促進(jìn)腫瘤血管生成.實(shí)體腫瘤在沒(méi)有新生血管形成以前腫瘤只能夠長(zhǎng)到1~3mm,不會(huì)發(fā)生轉(zhuǎn)移,在新生血管形成以后腫瘤會(huì)呈指數(shù)倍增長(zhǎng),轉(zhuǎn)移的機(jī)會(huì)隨之增加.而以直接蔓延作為主要轉(zhuǎn)移途徑的宮頸癌,其發(fā)生和轉(zhuǎn)移更依賴于新生血管的形成.近年來(lái)的研究表明,腫瘤血管生成與宮頸癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān),可用于判斷預(yù)后和觀察療效. 微血管密度(micr
3、ovascular density,MVD)被公認(rèn)為是反映腫瘤血管生成的最有效的客觀指標(biāo).CDl05(Endoglin)是新生血管內(nèi)皮細(xì)胞特異性標(biāo)志物,僅在增殖活躍的血管內(nèi)皮細(xì)胞中強(qiáng)表達(dá),比以往血管標(biāo)記因子更具優(yōu)越性.增殖細(xì)胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)是一種酸性核蛋白,為DNA聚合酶d的輔因子,主要在G1早期和S后期誘導(dǎo)DNA的合成,對(duì)DNA復(fù)制的調(diào)節(jié)起重要作用.環(huán)氧化酶.2
4、(cyclooxygenase-2,COX-2)是分解花生四烯酸(arachidonic acid,AA)生成各種內(nèi)源性前列腺素(prostaglandons,PGs)過(guò)程中重要的限速酶,它能引起炎癥反應(yīng)并通過(guò)多種機(jī)制促進(jìn)腫瘤新生血管的生成.本實(shí)驗(yàn)以免疫組化SP法檢測(cè)正常宮頸組織、癌前病變及宮頸鱗狀細(xì)胞癌中CD105、COX-2及PCNA的表達(dá),旨在探討微血管密度及細(xì)胞增殖在宮頸鱗狀細(xì)胞癌發(fā)生和發(fā)展中的作用及相互關(guān)系,為臨床合理選擇手術(shù)
5、方式及判斷預(yù)后、抗腫瘤治療新方法提供有價(jià)值指標(biāo)及理論依據(jù). 材料與方法 1 實(shí)驗(yàn)材料:宮頸標(biāo)本共96例,其中正常宮頸組織32例,宮頸上皮內(nèi)瘤變(cervical intraepithelial neoplasia,CIN) Ⅰ級(jí)7例,CIN Ⅱ級(jí)9例,CINⅢ級(jí)18例,宮頸鱗狀細(xì)胞癌共30例.所有取材的標(biāo)本術(shù)前均未接受過(guò)放療及化療,各標(biāo)本均經(jīng)病理證實(shí).在30例宮頸鱗狀細(xì)胞癌中,年齡24~65歲,平均年齡43歲;臨床分期采
6、用國(guó)際婦產(chǎn)科聯(lián)盟(international federation of Gynecology andObstetrics,FIGO)2000年修訂的臨床分期標(biāo)準(zhǔn),Ⅰ A期7例,Ⅰ B期11例,Ⅱ A期7例,Ⅱ B期5例;30例宮頸鱗狀細(xì)胞癌中26例做盆腔淋巴結(jié)清掃術(shù),發(fā)現(xiàn)有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者5例. 2 實(shí)驗(yàn)方法:應(yīng)用免疫組化SP染色法檢測(cè)CD105,PCNA,COX-2在宮頸鱗狀細(xì)胞癌及癌前病變和正常宮頸組織中的表達(dá)水平,計(jì)數(shù)CD1
7、05標(biāo)記的陽(yáng)性微血管數(shù)目,計(jì)算平均MVD值;以PCNA陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)計(jì)算增殖細(xì)胞指數(shù)(priliferation index.PI);圖象分析系統(tǒng)計(jì)算COX-2灰度值.所有數(shù)據(jù)資料均采用SPSS11-O軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析.計(jì)量資料均以a=O.05為檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn). 結(jié)果 1 CD105蛋白主要表達(dá)于新生血管的內(nèi)皮細(xì)胞胞膜或胞漿,呈棕黃色顆粒,被標(biāo)記的陽(yáng)性血管主要位于癌巢周?chē)拈g質(zhì)組織. MVD在正常宮頸中為5.13±2.3
8、0,在CINI中為11.57±1.40,在CINⅡ中為11.44±3.54,在CINⅢ中為12.56±2.20,在宮頸鱗癌中為15.40±2.90;在宮頸鱗癌中,高分化為14.71±2.43,中分化為13.77±2.24,低分化為18.00±2.16,低分化與前兩種間差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;依據(jù)FIGO2000標(biāo)準(zhǔn),Ⅰ期為14.17±2.68,Ⅱ期為17.25±2.18,差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;在進(jìn)行淋巴結(jié)清掃中發(fā)現(xiàn)有轉(zhuǎn)移者M(jìn)VD為18.00±2
9、.35,無(wú)轉(zhuǎn)移者為15.10±2.76,差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;以40歲將對(duì)象分為高低兩個(gè)年齡組,年輕組為16.64±2.20,年老組為14.68±3.06,其間差別不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義. 2 PCNA主要表達(dá)于增殖期細(xì)胞的細(xì)胞核,將細(xì)胞核染為棕黃色,見(jiàn)于腫瘤細(xì)胞的胞核、不典型增生的細(xì)胞胞核及部分宮頸正常鱗狀上皮基底層處于增殖期的細(xì)胞胞核;在癌巢中呈彌漫性表達(dá),表現(xiàn)為陽(yáng)性細(xì)胞成團(tuán)分布.PI值在正常宮頸中為4.97±2.65,在CINI中
10、為14.14±3.02,在CINII中為16.78±2.33,在CINIII中為31.22±3.61,在宮頸鱗狀細(xì)胞癌中為44.27±3.74;在宮頸鱗癌中,高分化為40.86±3.13,中分化為43.69±3.09,低分化為47.40±2.31,三者間差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;HGO I期為42.39±3.26,Ⅱ期為47.08±2.47,差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組為48.80±1.10,無(wú)轉(zhuǎn)移組為44.00±3.15,兩種間差別有統(tǒng)計(jì)
11、學(xué)意義:年輕組為45.36±2.94,年老組為43.63±4.07,兩者間差別不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義. 3 COX-2蛋白陽(yáng)性表達(dá)為細(xì)胞漿著色,陽(yáng)性細(xì)胞主要是腫瘤細(xì)胞、不典型增生細(xì)胞及部分取活檢部位的炎癥反應(yīng)細(xì)胞.陽(yáng)性細(xì)胞為棕黃色,著色深淺有差異. COX-2灰度值在正常宮頸中為104.90±1.72,在CINI中為115.05±2.75,在CIYlI中為115.42±3.03,在CINIII中為120.52±1.84,在宮頸
12、鱗狀細(xì)胞癌中為132.79±2.24;在宮頸鱗癌病理分級(jí)中,高分化為130.16±1.65,中分化133.22±1.36,低分化134.08±2.11,高分化與中、低分化間差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,但中、低分化間差別無(wú)意義;FIGO I期中為132.23±1.79和Ⅱ期中133.62±2.66間的差別不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組為135.70±1.60和無(wú)轉(zhuǎn)移組132.30±1.84間差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;年輕組134.06±2.01與年老組1
13、32.06±2.08間差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義. 結(jié)論;1 cb105標(biāo)記的MVD與宮頸鱗狀細(xì)胞癌的病理分級(jí)及FIGO臨床分期密切相關(guān),說(shuō)明血管生成與宮頸鱗狀細(xì)胞癌的惡性程度及病變范圍有關(guān),印證了腫瘤血管生成理論.MVD與淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移亦有關(guān),說(shuō)明血管生成促進(jìn)了宮頸鱗狀細(xì)胞癌體積增大,符合宮頸癌直接蔓延的轉(zhuǎn)移途徑,并且容易使與宮頸鱗狀細(xì)胞癌浸潤(rùn)淋巴管,形成瘤栓,隨淋巴液引流到達(dá)局部淋巴結(jié). 2 PCNA標(biāo)記的PI在正常宮頸、C
14、IN各級(jí)及宮頸鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)差異具有顯著性.PCNA的表達(dá)與宮頸鱗狀細(xì)胞癌的病理分級(jí)、FIGO分期密切相關(guān),并與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移正相關(guān),說(shuō)明宮頸鱗狀細(xì)胞癌的增殖能力越強(qiáng),惡性程度越高,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移能力就越強(qiáng),可作為宮頸鱗狀細(xì)胞癌的早期診斷指標(biāo). 3 COX-2在正常宮頸、CIN各級(jí)及宮頸鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)差異具有顯著性.COX-2在不同HGO分期的宮頸鱗狀細(xì)胞癌患者中的表達(dá)無(wú)明顯差異,與宮頸鱗狀細(xì)胞癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、患者年齡及病理分級(jí)
15、呈正相關(guān).在宮頸鱗狀細(xì)胞癌中,COX-2的表達(dá)與患者年齡有關(guān),可能是年輕患者相對(duì)性生活比較活躍,有較多患者合并慢性宮頸炎,致使COX-2在年輕患者中表達(dá)較高.4 CD105、PCNA及COX-2在正常宮頸組織、宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變和宮頸鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)有顯著性差異,并且三者的表達(dá)呈正相關(guān);提示三者在誘導(dǎo)機(jī)制上存在關(guān)聯(lián),協(xié)同促進(jìn)宮頸鱗狀細(xì)胞癌的發(fā)生與發(fā)展.聯(lián)合檢測(cè)宮頸鱗狀細(xì)胞癌中的MVD及PCNA值,有助于了解宮頸鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞的生物學(xué)行
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