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文檔簡介
1、目的:觀察白細胞介素6(interleukin-6,IL-6)和白細胞介素10(interleukin-10,IL-10)在大鼠煙曲霉菌性角膜炎固有免疫階段角膜上皮組織中的表達并分析其表達量變化的原因。
方法:健康Wistar大鼠72只,雌雄不限,在刮除中央?yún)^(qū)角膜上皮的大鼠角膜上涂以煙曲霉菌標準菌落并覆蓋自制角膜接觸鏡,建立大鼠煙曲霉菌性角膜炎感染模型。大鼠隨機分為2部分,用于免疫組織化學實驗的A1、B1、C1組(每組各6
2、只大鼠)和用于RT-PCR實驗的A2、B2、C2(A2組6只、B2、C2組24只):A1、A2組為空白對照組,不予任何處理:B1、B2組為損傷對照組,建立模型,僅刮除中央?yún)^(qū)角膜上皮后覆蓋角膜接觸鏡,不涂抹真菌;C1、C2組為真菌模型組,建立真菌模型。成功建模后4h打開眼瞼,并于造模后第4h、8h、16h、24h處死大鼠,取角膜上皮組織。HE染色觀察角膜組織病理變化并檢測真菌生長,運用免疫組織化學和RT-PCR技術檢測各組不同時間點IL-
3、6與IL-10的表達情況。
結果:
1.組織病理學觀察見真菌性角膜炎病灶內有炎癥細胞浸潤,HE染色檢查在角膜基質層可見菌絲及孢子。
2.IL-6在空白對照眼角膜基本不表達或極微量表達;真菌實驗組在接種真菌后4h開始出現(xiàn)IL-6的表達,并逐漸增高,在第24h表達量升高顯著,各時間點比較差異具有顯著性(P<0.01)。
3.IL-10在空白對照組角膜基本不表達或極微量表達;真菌實驗組在
4、真菌刺激后4h開始出現(xiàn)IL-10的表達,并逐漸增高,在24h表達量升高顯著,各時間點比較差異有顯著性((P<0.01)。
結論:1.10%氫氧化鉀涂片及組織刮取物行菌落培養(yǎng)證實大鼠真菌性角膜炎動物模型建立成功。2.IL-6在煙曲霉菌性角膜炎角膜上皮組織中早期即開始表達,表達量逐漸增高,其表達量的增高與角膜炎癥程度呈正相關,在大鼠煙曲霉菌性角膜炎病程中是一個敏感的炎癥因子,能反映局部的炎癥反應程度。3.IL-10表達于真菌性
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