Th17細(xì)胞因子在小鼠真菌性角膜炎中的表達(dá).pdf

1、目的：通過建立真菌性角膜炎小鼠模型，觀察真菌性角膜炎的發(fā)生發(fā)展，探索TH17細(xì)胞因子在真菌性角膜炎中的表達(dá)情況，初步探討IL-17及TH17細(xì)胞在真菌性角膜炎免疫學(xué)中的作用。
　　方法：清潔級BALB/c小鼠隨機(jī)分成兩組，其中一組為真菌感染組，小鼠右眼采用角膜表層鏡片法建立茄病鐮刀菌性角膜炎模型；另一組為損傷對照組，以PBS代替真菌菌液采取與感染組相同方法處理小鼠右眼。分別于感染后第1、3、5、7天，裂隙燈顯微鏡觀察角膜炎特點并行

2、臨床評分；HE染色觀察角膜病理變化；實時熒光定量PCR檢測角膜中Th17細(xì)胞因子（IL-17）及其特異性轉(zhuǎn)錄因子RORγt的mRNA基因的表達(dá)變化；酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測IL-17因子蛋白的表達(dá)變化。
　　結(jié)果：1.病變特征
　　所有小鼠真菌性角膜炎模型建立成功，真菌感染早期呈全角膜的彌漫性炎癥反應(yīng)，浸潤混濁進(jìn)行性加重，感染后3天角膜灰白色霧狀混濁，5天時病變典型，角膜周邊新生血管長入，中央形成潰瘍，第7天后病灶趨向好轉(zhuǎn)，總病

3、程持續(xù)約12天。臨床評分各時間點有統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.05）。
　　2.病理學(xué)檢查
　　HE染色可見早期角膜基質(zhì)水腫，感染后第5天角膜基質(zhì)紊亂多形粒細(xì)胞浸潤明顯增多，前房內(nèi)可見滲出，晚期角膜基質(zhì)中可見新生血管及管內(nèi)紅細(xì)胞，潰瘍被瘢痕組織取代。
　　3.Real time PCR與ELISA檢測結(jié)果
　　Thl7細(xì)胞因子（IL-17）和Th17細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子（RO Rγt）基因mRNA在真菌感染角膜后均出現(xiàn)表達(dá)