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文檔簡介
1、目的:觀察白細(xì)胞介素10(interleukin-10,IL-10)及環(huán)氧合酶2(cyclooxygenase,COX-2)在大鼠真菌性角膜炎中的表達(dá)情況,給予選擇性COX-2抑制劑NS-398,觀察藥物干預(yù)前后IL-10的變化并分析其意義。
方法:健康Wistar大鼠85只,雌雄不限,在刮除上皮的大鼠角膜涂布以茄病鐮刀菌標(biāo)準(zhǔn)菌落并覆蓋自制角膜接觸鏡,建立角膜真菌感染模型。大鼠隨機分為3組,A組5眼為空白對照組、B組40眼
2、為真菌感染模型組、C組40眼為模型加藥物干預(yù)組,其中A組不予任何處理,B、C兩組右眼均為實驗眼,建立真菌模型,左眼為實驗對照眼,僅覆蓋角膜接觸鏡。模型建立后實驗組分別于模型建立后第1天打開眼瞼,B組給予PBS滴眼,C組給予NS-398滴眼,每日4次。造模后第1d、3d、7d、14d處死大鼠,取角膜。HE染色、PAS染色觀察角膜組織病理變化并檢測真菌生長,運用免疫組織化學(xué)和RT-PCR技術(shù)檢測各組不同時間點COX-2與IL-10的表達(dá)情況
3、。
結(jié)果:1、組織病理學(xué)觀察見真菌性角膜炎病灶內(nèi)有大量中性粒細(xì)胞浸潤并伴有嚴(yán)重的組織壞死,PAS染色檢查見菌絲及孢子可達(dá)基質(zhì)淺層及中層。2、COX-2在空白對照及對照眼角膜基本不表達(dá);B組在接種真菌后1d開始出現(xiàn)COX-2的表達(dá),并逐漸增高,第14d表達(dá)減弱至不明顯,各時間點比較差異具有顯著性(P<0.01);C組與B組比較第1d、14dCOX-2表達(dá)差異無顯著性(P>0.05),3d、7d表達(dá)明顯降低,差異具有顯著性(P
4、<0.01)。3、IL-10在空白對照及對照組角膜基本不表達(dá);B組在接種真菌后IL-10的表達(dá)先增高后降低,各時間點比較差異有顯著性(P<0.01);右眼C組與B組比較第1dIL-10表達(dá)差異無顯著(P>0.05),3d下降、7d、14d表達(dá)明顯增高,差異具有顯著性(P<0.01)。
結(jié)論:1、PAS染色、10%氫氧化鉀涂片及組織刮取物行菌落培養(yǎng)證實大鼠真菌性角膜炎動物模型建立成功。2、COX-2表達(dá)于真菌性角膜炎組織中,
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