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文檔簡介
1、雷公藤多苷片是由雷公藤的干燥根提取、純化制得的,具有良好的抗炎、免疫抑制的藥理作用,臨床上廣泛用于治療類風濕關節(jié)炎、腎病綜合征等疾病,療效確切。但臨床不良反應高發(fā),且臨床應用表明不同廠家的雷公藤多苷片藥效和毒副反應有較大差異。由于雷公藤化學成分復雜,多個成分既為有效成分又為毒性成分,而目前多僅對雷公藤甲素(雷公藤內(nèi)酯醇)或雷公藤內(nèi)酯甲進行含量控制,無法全面的對雷公藤多苷片的藥效和毒性進行控制。明確藥效成分和毒性成分,建立全面科學、符合中
2、藥制劑整體起效特點的質(zhì)量控制方法,是當前研究的熱點和難點。本文擬通過體外實驗,評價不同廠家的藥效及毒效差異,結合雷公藤多苷片高效液相指紋圖譜,通過統(tǒng)計學方法建立雷公藤多苷片藥效、毒效數(shù)據(jù)與高效液相指紋圖譜色譜峰之間的相互關系,篩選出主要藥效成分和毒性成分,為尋找科學合理的藥效評價指標、質(zhì)控指標以及為臨床合理用藥提供科學依據(jù)。
本課題采用高效液相色譜分析法,選擇7個不同廠家雷公藤多苷片,建立高效液相指紋圖譜,共計篩選出18個特征
3、色譜峰。對7個廠家樣品指紋圖譜中18個特征峰峰面積進行相似度分析、聚類分析、主成分分析,得到第5、6、7、9、10、15、18號峰是區(qū)分7個廠家雷公藤多苷片的主要特征峰。
采用LPS刺激的小鼠單核巨噬細胞RAW264.7細胞炎癥模型考察不同廠家雷公藤多苷片抗炎藥效,以細胞增殖抑制IC50、TNF-α和IL-6含量為指標,分析抗炎藥效與雷公藤指紋圖譜的譜效關系。發(fā)現(xiàn)以細胞增殖抑制IC50為指標時,第1、2、6、7、8、17、18
4、號峰是主要藥效峰;以TNF-α抑制率為指標時,第1、3、5、6、7、13、15、18號峰是主要藥效峰;以IL-6抑制率為指標時,第3、4、5、9、10、11、14、15、16號峰是主要藥效峰。
采用Con A刺激的小鼠脾細胞模型考察雷公藤多苷片免疫抑制藥效,以細胞增殖抑制IC50、細胞因子IFN-γ和IL-2含量為指標,分析免疫抑制藥效與雷公藤指紋圖譜的譜效關系。發(fā)現(xiàn)以細胞增殖抑制IC50為指標時,第1、2、6、7、17、18
5、號峰是主要藥效峰;以IFN-γ抑制率為指標時,第1、2、6、7、8、9、12、13號峰是主要藥效峰;以IL-2抑制率為指標時,第1、2、6、7、8、13、17、18號峰是主要藥效峰。
體外毒效試驗選擇大鼠肝細胞、小鼠腎小球系膜細胞、大鼠心肌細胞分別考察雷公藤的肝、腎、心臟體外細胞毒性,以細胞增殖抑制IC50為指標,分析毒效與雷公藤指紋圖譜的譜效關系,得出在肝細胞毒性方面:第1、2、8、9、12、13號峰是主要毒效峰;在腎細胞毒
6、性方面:第1、2、6、7、17、18號峰是主要毒效峰;在心臟細胞毒性方面:第6、7、13、17號峰是主要毒效峰。綜合3個方面的毒性數(shù)據(jù),得出A廠家體外肝、腎、心臟毒性較大,D廠家對肝細胞毒性最弱,F(xiàn)廠家對腎小球系膜細胞毒性最弱,E廠家對心肌細胞毒性最弱。
綜合藥效與毒效試驗結果,得出:A廠家抗炎、免疫抑制藥效最好,但毒性也最強;B廠家抗炎藥效較弱,腎細胞毒性較小,肝細胞毒性和心臟細胞毒性卻較大;G廠家免疫抑制藥效較弱,毒性中等
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