冬凌草甲素對人胰腺癌SW1990細胞的生長抑制作用及其機制研究.pdf

1、目的:研究冬凌草甲素(Oridonin,Ori)對人胰腺癌SW1990細胞生長抑制作用,并探究其可能作用機制。
　　 方法:采用組織芯片技術(shù)和免疫組化法檢測胰腺癌組織中Survivin,Bax,Bc1-2蛋白的表達；MTT法檢測不同濃度Ori對人胰腺癌SW1990細胞增殖的抑制作用；Hoechst33258染色法和透射電鏡觀察細胞形態(tài)學(xué)變化:流式細胞儀檢測細胞周期改變與凋亡率；RT-PCR法檢測survivin、p53、p21、

2、cyclinB1、cdc2、bc1-2、bax和cytochrome c等基因mRNA表達的改變。
　　 結(jié)果:免疫組化結(jié)果顯示Survivin,Bax,Bc1-2蛋白在胰腺癌中高表達且與臨床分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān),Survivin陽性表達與Bc1-2呈正相關(guān)而與Bax呈負相關(guān)。MTT法顯示Ori對人胰腺癌SW1990細胞具有顯著的生長抑制作用并呈明顯的時間劑量依賴性。熒光顯微鏡和透射電鏡下均見到典型的凋亡形態(tài)學(xué)改變,流式分析結(jié)果

3、顯示Ori能同時誘導(dǎo)SW1990細胞凋亡和G2/M期周期阻滯。10、20、40μmol/L Ori作用SW1990細胞24h后凋亡率分別為1.84％、5.41％(P<0.01)、16.56％(P<0.01),RT-PCR分析顯示p53、p21、bax和cytochrome c mRNA表達增加而survivin、cyclinB1、cdc2和bc1-2 mRNA表達減少。
　　 結(jié)論:Ori通過誘導(dǎo)凋亡和G2/M期周期阻滯來抑制人