冬凌草甲素通過下調NF-κB、XIAP表達增強吉西他濱對胰腺癌SW1990的抑瘤效應.pdf

1、論文題目：冬凌草甲素通過下調NFKB、XIAP表達增強吉西他濱對胰腺癌SWl990的抑瘤效應答辯委員會主席：基迄益遂￡至逝曼么遂2答辯委員會成員：茸盈之拯擅【啤i瑙厶氬啦2生顯盜益罐』齟垴岫瑙蝴論文答辯日期矽J羅年羅月涉日溫少li醫(yī)科大學碩士學位論文冬凌草甲素通過下調NFKB、XIAP表達增強吉西他濱對胰腺癌$W1990的抑瘤效應中文摘要目的探討冬凌草甲素在體外能否增強吉西他濱對胰腺癌細胞的抑瘤效應及其可能的作用機制。方法采用不同濃度的

2、冬凌草甲素(0pM，10HM，20uM，40uM，80uM，160uM)分別處理胰腺癌SWl990細胞24h，48h，72h后，CCK一8法檢測胰腺癌細胞株SWl990細胞的增殖情況，流式檢測細胞周期分布情況，并選擇一個最合理的冬凌草甲素藥物濃度：進一步采用冬凌草甲素(40uM)與吉西他濱(20uM)分別單獨及聯(lián)合處理胰腺癌S冒1990緬施48小時，并設立對黑組，CCK一8法檢測各處理組SWl990細胞的存活率；AnnexinVFITC

3、／PI雙染流式細胞術檢測各處理組細胞凋亡情況；Westernblot檢測各處理組SWl990細胞中NF—KB和XIAP(X1inkedinhibitorofapoptosisprotein)蛋白的表達水平；RT—PCR檢測SWl990細胞中NFKB和XIAP基因的表達水平。結果不同濃度冬凌草甲素處理SWl990細胞后，CCK一8檢測細胞增殖，結果可見：SWl990細胞生長抑制率不但隨藥物濃度的增加逐漸升高，亦隨著處理時間的延長而升高，有

4、明顯的劑量和時間依賴性；40umol／L冬凌草甲素作用48h后，細胞抑制率接近50％；流式檢測細胞周期分布，結果可見：與對照組相比，冬凌草甲素組G，期細胞比例明顯增加，并且隨著冬凌草甲素濃度的增高，G。期細胞比例亦隨著增高。冬凌草甲素單獨及聯(lián)合吉西他濱處理細胞后，’CCK8檢測細胞增殖，聯(lián)合組細胞的存活率為2563％，與吉西他濱組(4375％)和冬凌草甲素組(4782％)比較，差異均有統(tǒng)計學意義；流式細胞術檢測各處理組細胞凋亡，吉西他濱

5、與冬凌草甲素單獨作用時，SWl990細胞的凋亡率分別為21％和324％，而聯(lián)合組SWl990細胞的凋亡率為567％，較其余各組細胞的凋亡率增加更明顯(P001)；表明冬凌草甲素和吉西他濱對SWl990細胞增殖抑制及促凋亡均有協(xié)同作用。冬凌草甲素單獨及聯(lián)合吉西他濱處理細胞后，Westernblot檢測各處理組NFKB和XIAP的蛋白表達，吉西他濱能上調SWl990細胞中NFKB和XIAP蛋白的表達(尸005)，冬凌草甲素單藥、冬凌草甲素聯(lián)