GABA及其受體對(duì)胰腺癌SW1990細(xì)胞增殖轉(zhuǎn)移影響及機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、第一部分：GABA、GABAB受體拮抗劑對(duì)胰腺癌細(xì)胞增殖影響及機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究 目的：研究γ-氨基丁酸(GABA)及B受體拮抗劑對(duì)人胰腺癌SW1990細(xì)胞增殖和凋亡的影響及其信號(hào)傳導(dǎo)途徑。 方法：應(yīng)用MTT法和FCM檢測(cè)GABA及其B受體拮抗劑對(duì)胰腺癌SW1990細(xì)胞增殖、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期和bcl-2蛋白表達(dá)的影響，應(yīng)用γ-閃爍記數(shù)儀測(cè)定細(xì)胞內(nèi)環(huán)磷酸腺苷(cAMP)含量。 結(jié)果：GABA能顯著的促進(jìn)胰腺癌SW19

2、90細(xì)胞的生長(zhǎng)(P<0.01)，呈劑量依賴性，這種作用不能被GABAB受體拮抗劑所阻斷，GABA可顯著促進(jìn)細(xì)胞周期比例的分布，隨著GABA從20umol/L-320umol/L的增加，G<,0>/G<,1>期比例由74.29％下降到46.18％，而G<,2>/M期由10.93％上升到28.5％，細(xì)胞凋亡率由27.5％降低到5.4％，同時(shí)GABA可顯著促進(jìn)胰腺癌SW1990細(xì)胞內(nèi)cAMP含量的增加，這些作用也不能被GABA<,B>受體拮抗

3、劑所抑制。 結(jié)論：GABA能夠抑制胰腺癌SW1990細(xì)胞的凋亡，影響細(xì)胞周期的分布，促進(jìn)SW1990細(xì)胞的增殖，這種作用可能是通過(guò)B受體亞單位來(lái)實(shí)現(xiàn)的，或者是通過(guò)GABA<,A>受體介導(dǎo)；其受體后信息傳導(dǎo)可能是通過(guò)腺苷酸環(huán)化酶途徑。 第二部分：GABA、GABAA受體激動(dòng)劑對(duì)胰腺癌細(xì)胞增殖及MMP-2表達(dá)的影響 目的：探討γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid，GABA)及A受體激動(dòng)劑THIP對(duì)胰腺

4、癌SW1990細(xì)胞系增殖及其表達(dá)基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)的調(diào)控作用。 方法：采用MTT法檢測(cè)SW1990細(xì)胞的生長(zhǎng)；利用免疫共聚焦技術(shù)觀察GABA、THIP作用后MMP-2表達(dá)強(qiáng)度的變化；通過(guò)熒光定量PCR(real-time PCR)定量檢測(cè)MMP-2mRNA的表達(dá)變化。 結(jié)果：GABA、THIP作用細(xì)胞后，均能促進(jìn)其生長(zhǎng)，且呈劑量依賴性，GABA組與對(duì)照組比差異顯著(P<0.01)，THIP能促進(jìn)細(xì)胞的增殖，