ERCC1表達(dá)與胃癌細(xì)胞株耐藥關(guān)系實驗研究.pdf

1、目的:探討ERCC1基因在胃癌細(xì)胞系中的表達(dá)及對胃癌細(xì)胞順鉑耐藥的影響。
　　 方法:常規(guī)培養(yǎng)胃癌SGC7901/DDP、SGC7901細(xì)胞株,用RT-PCR及WesternBlot分別檢測ERCC1 mRNA及蛋白表達(dá)；觀察順鉑處理后不同時間SGC7901細(xì)胞株ERCC1基因表達(dá)情況,以及不同濃度順鉑作用48小時后ERCC1基因表達(dá)的變化；最后,四氮唑藍(lán)比色法(MTT)檢測順鉑處理后細(xì)胞存活率,計算半數(shù)抑制濃度(TC50)及耐

2、藥倍數(shù)。
　　 結(jié)果:
　　 1.SGC7901/DDP、SGC7901細(xì)胞株中均有ERCC1基因的表達(dá),RT-PCR反應(yīng)及Western Blot檢查結(jié)果提示耐藥細(xì)胞株SGC7901/DDP mRNA和蛋白表達(dá)水平明顯高于SGC7901細(xì)胞株,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義,(P<0.05)。
　　 2.在時間處理組上分別于0、24、48、72、96h收獲細(xì)胞,RT-PCR和WesternBlot檢測細(xì)胞系ERCC1基因m

3、RNA和蛋白表達(dá)情況的結(jié)果顯示,經(jīng)過DDP誘導(dǎo),細(xì)胞隨處理時間延長ERCC1表達(dá)逐漸增強。不同濃度順鉑作用48小時后ERCC1基因表達(dá)的變化為,低濃度順鉑作用時,SGC7901細(xì)胞的ERCC1基因表達(dá)略有升高,隨著順鉑濃度的增加,ERCC1基因表達(dá)呈下降趨勢。
　　 3.MTT檢測順鉑處理后細(xì)胞存活率結(jié)果表明,SGC7901/DDP、SGC7901對DDP的IC50值分別為15.70±0.37μg/ml、5.53±0.13μg/