連翹酯苷A與β-環(huán)糊精包合作用及活性研究.pdf

1、連翹為木犀科連翹屬植物連翹(Forsythia suspense(Thunb.)Vahl)的干燥果實，為中國藥典收載的常用中藥，山西省為連翹的主要產(chǎn)地之一。本課題主要研究了連翹中連翹酯苷A的提取工藝、分離純化、生物活性以及與β-CD包合作用。具體工作如下:
　　1.對中草藥連翹、超分子化學(xué)的研究及天然抗氧化劑研究進(jìn)展?fàn)顩r作了簡要概述。
　　2.采用正交實驗對連翹酯苷A的提取工藝進(jìn)行優(yōu)化研究。實驗結(jié)果顯示連翹酯苷A的最佳提取工

2、藝為:連翹加入10倍量的40％乙醇，在70℃下，提取2次，每次1.5h。
　　3.利用聚酰胺樹脂、反相柱層析法對連翹酯苷A進(jìn)行分離純化并對其結(jié)構(gòu)進(jìn)行鑒定研究。結(jié)果表明使用聚酰胺樹脂初步分離連翹酯苷A，可除去大量雜質(zhì)，粗產(chǎn)物連翹酯苷A含量可達(dá)70％以上。進(jìn)一步利用反相柱層析進(jìn)行反復(fù)純化，經(jīng)HPLC測定連翹酯苷A含量達(dá)95％以上。采用UV、IR、NMR進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定，證明為連翹酯苷A。
　　4.利用熒光光譜法研究了連翹酯苷A與β-

3、CD的包合作用，并輔以分子模擬與核磁共振技術(shù)探討了包合作用機(jī)理。結(jié)果顯示連翹酯苷A與β-CD形成1∶1包合物。1HNMR和分子模擬表明連翹酯苷A的B環(huán)可能進(jìn)入β-CD的親脂空腔， A環(huán)被暴露在空腔外面。溶液的離子強度，溫度，和pH值對包和物的形成常數(shù)有很大影響，連翹酯苷A與β-CD在pH=5，CNaCI=0.1mol·L-1，并且T=19℃時，包合物容易形成。包和過程的熱力學(xué)常數(shù)表明包合過程是放熱、自發(fā)進(jìn)行的過程。
　　5.采用D

4、PPH法研究連翹酯苷A及包合物的抗氧化活性。實驗結(jié)果顯示連翹酯苷A及包合物具有較強的抗氧化能力，其IC50分別為6.0×10-6，4.2×10-6mol·L-1，表明包合物的抗氧化能力略強于連翹酯苷A。
　　6.采用血小板聚集測定法-比濁法初步研究了連翹酯苷A體外抗凝活性。實驗結(jié)果顯示連翹酯苷A對ADP誘導(dǎo)的大鼠血小板聚集具明顯的抑制作用，其IC50為8.3mmol·L-1。并且連翹酯苷A可明顯延長大鼠血漿PT和TT，與對照相比均