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1、本課題主要以青海玉樹地區(qū)名貴的中藥手參塊根為原料,系統(tǒng)的研究手參多糖的提取工藝,分離純化,結(jié)構(gòu)分析,初步研究了手參多糖的毒理特性,為手參資源的開發(fā)及向保健品發(fā)展提供參考。
在提取工藝研究中,本文就溶劑浸提、微波提取,超聲提取和酶法提取條件中各因素對(duì)手參多糖提取效果的影響,通過單因素,正交試驗(yàn)研究,確定了這四種方法的最佳提取條件,溶劑浸提的最佳條件是:溫度80℃,料液比30倍,時(shí)間2.5 h,提取3次,手參多糖的含量為11.
2、83%;微波提取的最佳條件是:功率250 W,料液比30倍,時(shí)間20 min,微波提取1次,手參多糖的含量是13.56%;超聲提取的最佳條件是:超聲功率240 W,超聲時(shí)間10 min,超聲溫度60℃,超聲提取3次,手參多糖的含量是15.24%;纖維素酶提取的最適pH4.8,最適溫度50℃,酶的添加量為手參量的1%,酶解時(shí)間4 h,手參多糖的含量是16.58%。在手參多糖的分離過程中,主要采用醇沉的方法除去手參多糖粗提物中的一些小分子物
3、質(zhì)和低聚糖等雜質(zhì)。采用Sevage法,脫除手參多糖粗提物中的蛋白質(zhì)。脫蛋白后的手參多糖經(jīng)凍干,所得樣品為不含小分子雜質(zhì)和游離蛋白雜質(zhì)的手參多糖,多糖含量為72.38%,用于急性毒理試驗(yàn)研究。
將手參多糖復(fù)溶于蒸餾水,可溶性多糖經(jīng)DEAE-纖維素、葡聚糖凝膠層析柱分級(jí)分離,得到GCP-1、GCP-2a,將GCP-2a用于結(jié)構(gòu)分析。通過紅外光譜圖譜分析確定純化的GCP-2a具有多糖的特征結(jié)構(gòu)及官能團(tuán):糖的吡喃環(huán)、羰基、羥基和氨
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