草魚皮膠原蛋白的制備及性質(zhì)研究.pdf

1、本文研究了草魚皮的預(yù)處理工藝條件，采用氫氧化鈉中添加雙氧水方法可以同時(shí)起到脫色、脫雜蛋白、脫脂肪的作用，以及其對(duì)膠原蛋白的溶解性的影響。提取關(guān)鍵參數(shù)—溫度對(duì)膠原蛋白提取率及性質(zhì)的影響；酸溶性膠原蛋白和酶溶性膠原蛋白的性質(zhì)區(qū)別；草魚皮和豬皮中Ⅰ型膠原蛋白和Ⅲ型膠原蛋白純化及電泳鑒定。 1．不同濃度雙氧水和氫氧化鈉溶液處理草魚皮，可以同時(shí)起到脫色、脫雜蛋白以及脫脂作用，氫氧化鈉濃度越高，脫色速度越快，反應(yīng)也越劇烈，雙氧水濃度對(duì)膠原蛋

2、白脫色無(wú)明顯影響，在0.1 mol/L的氫氧化鈉溶液含1％雙氧水中只需6小時(shí)就可以完全脫去色素，在0.01 mol/L的氫氧化鈉含1％雙氧水溶液中，魚皮浮在溶液表面色素漸退，無(wú)法看到黑色素體轉(zhuǎn)變?yōu)榈S色；0.01 mol/L-0.2 mol/L氫氧化鈉能夠有效的去除魚皮中的非膠原蛋白，但是氫氧化鈉濃度越高，可能導(dǎo)致膠原蛋白的降解在預(yù)處理溶液中；在20℃條件下，含1％H<,2>O<,2> 0.01mol/L NaOH溶液可以有效脫去脂肪，

3、脫脂率約為70％。 2．在含1％雙氧水不同濃度氫氧化鈉處理魚皮以后，對(duì)魚皮膠原蛋白性質(zhì)產(chǎn)生了影響。在20℃，1％過(guò)氧化氫，0.1 mol/L的氫氧化鈉溶液中處理草魚皮24小時(shí)后，即使在加酶的醋酸中，提取48小時(shí)，提取率也只有8％。表明膠原蛋白之間發(fā)生了交聯(lián)，而在0.01 mol/L氫氧化鈉或4℃條件下處理膠原蛋白，對(duì)膠原蛋白的提取率影響較小，所以只能選擇濃度較低的氫氧化鈉或在低溫處理魚皮。 3．溫度和是否加酶對(duì)膠原蛋白提

4、取率影響很大。在醋酸溶液或醋酸加酶溶液中，溫度越高，提取率越高。相同溫度條件下，醋酸加酶的溶液膠原蛋白提取率高于醋酸溶液。但是SDS-PAGE電泳顯示，在30℃條件下，不論醋酸溶液或醋酸加酶溶液提取的膠原蛋白都發(fā)生了變性，膠原蛋白肽鏈發(fā)生了降解，在4℃和20℃提取的膠原蛋白三螺旋結(jié)構(gòu)保持完整，具有完整生物學(xué)活性。 4．從草魚皮中提取的酸溶性膠原蛋白和酶溶性膠原蛋白，紫外光譜分析，最大吸收峰都接近223nm處；SDS-PAGE電泳

5、圖譜顯示：酸溶性膠原蛋白含有較多β、γ和多聚體，平均分子量高于酶溶性膠原蛋白，草魚皮ASC和PSC熱變性溫度分別為33.8℃、34.5℃，只比豬皮的熱變性溫度(37℃)低3℃左右。表明草魚皮膠原蛋白在功能食品、醫(yī)藥、化妝品、制藥等方面有潛在的應(yīng)用。 5．在pH 7.4條件下，在不同鹽濃度下分別沉淀草魚皮和豬皮膠原蛋白，Ⅲ型膠原蛋白在1.8mol/L鹽濃度(pH 7.4)完全沉淀，此時(shí)絕大多數(shù)Ⅰ型膠原蛋白溶解在溶液中，最終在2.5