絞股藍總皂苷及其微生物轉化產物的制備與生物活性研究.pdf

1、絞股藍[Gynostemma pentaphyllum(Thunb) Makino]為葫蘆科多年生落葉草質宿根藤本植物，是目前已知的除五加科植物人參屬以外，唯一含有人參皂苷類成分的植物。大量研究表明，絞股藍皂苷在抗氧化、抗炎、抗癌、改善免疫力等方面都表現出較高活性，因此絞股藍一直都是研究開發(fā)中備受關注的藥用植物。
　　本論文是從絞股藍中提取絞股藍總皂苷，通過微生物轉化，切除絞股藍皂苷側鏈的糖苷，從而獲得經過微生物代謝后的次級絞股藍

2、皂苷。并比較研究轉化前后絞股藍總皂苷的生物學效應。主要研究內容及結果如下:
　　比較水浴加熱提取與超聲提取兩種方法對絞股藍總皂苷提取效率的影響，結果表明超聲法提取率高于水浴加熱提取率。結合上述實驗結果，正交實驗優(yōu)化超聲法的最佳提取條件為90％乙醇，料液比為1∶20，提取時間為50min。
　　通過靜態(tài)吸附和動態(tài)洗脫研究比較了大孔吸附樹脂D101、HP-20、DM130及AB-8對絞股藍總皂苷的富集純化效果。結果表明DM130

3、大孔吸附樹脂對絞股藍總皂苷的富集純化效果最佳。以乙醇作為洗脫劑，對于動態(tài)洗脫方法最佳的乙醇體積分數為70％。
　　以硅膠和聚酰胺為層析柱的填料，薄層層析跟蹤檢測，對轉化前絞股藍總皂苷進行柱層析分離，獲得50.4mg皂苷化合物GYP-C1，分子量為1093.6和18.4mg的皂苷化合物GYP-C2，分子量961.5。并通過NMR鑒定出這兩種化合物的結構，發(fā)現GYP-C1可能是尚未發(fā)現的皂苷化合物。GYP-C2為2-羥基-3-O-β-

4、D-吡喃葡萄糖(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖-20(S)-原人參二醇-20-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。
　　以灰綠曲霉和青霉菌分別轉化福建南靖絞股藍總皂苷，HPLC檢測比較轉化前后的絞股藍總皂苷成分的變化，結果表明經兩種菌株分別轉化后，在總皂苷中分別產生了不同于轉化前的皂苷成分。
　　通過本實驗室建立的酪氨酸酶活性測定方法測定轉化前后的總皂苷對酪氨酸酶的抑制活性，結果發(fā)現轉化前的絞股藍總皂苷對酪氨酸酶具有抑制作用，使酶活力下