EGCG對低氧狀態(tài)下胃癌細胞增殖及凋亡的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
   通過CoC12構(gòu)建低氧模型,檢測沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)對低氧培養(yǎng)下人胃癌SGC7901細胞增殖、凋亡以及HIF-1α及其下游靶基因VEGF表達的影響,并對EGCG影響HIF-1α表達的機制進行初步研究。
   方法:
   ㈠設(shè)不同濃度的CoC12組,通過MTT法測定細胞存活率,RT-PCR和Western Blot檢測HIF-1α的表達。
   ㈡通過CoC12建立低氧模型,設(shè)

2、常氧組、低氧組及低氧加EGCG組,采用MTT法檢測細胞活力,流式細胞儀檢測細胞凋亡,RT-PCR和Western Blot檢測HIF-1α和VEGF的表達。
   ㈢通過CoC12建立低氧模型,設(shè)常氧組、低氧組及低氧加EGCG組,通過Western Blot檢測各組細胞中ERK1/2及p- ERK1/2的表達。
   結(jié)果:
   ㈠⑴各時間點,200及250μmol/L CoC12對細胞生長影響較大,而150μ

3、mol/L CoC12影響相對較小。
   ⑵ HIF-1α mRNA在各時間點及各CoC12濃度組的表達無明顯差異。
   ⑶CoC12處理48h后,HIF-1α蛋白表達最高,且表達量隨著CoC12濃度的增加而增加,200與250μmol/L CoC12組表達最高,150μmol/L組次之。
   ㈡⑴隨著濃度及時間的增加,EGCG可進一步抑制低氧狀態(tài)下細胞的增殖。
   ⑵低氧時EGCG呈時間-劑量依

4、賴性地誘導(dǎo)細胞凋亡。
   ⑶ EGCG可明顯抑制低氧誘導(dǎo)的HIF-1α和VEGF蛋白的表達,并下調(diào)VEGF mRNA表達,但對HIF-1α mRNA的轉(zhuǎn)錄無明顯影響。
   ㈢低氧時p-ERK較常氧時表達上調(diào),而EGCG可抑制低氧時p-ERK的表達;總ERK在各組的表達無明顯差異。
   結(jié)論:
   1.150μmol/L CoC12對細胞生存影響小,并能明顯上調(diào)細胞內(nèi)HIF-1α蛋白的表達;48h時

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