Survivin反義寡核苷酸對大鼠肝星狀細胞HSC-T6凋亡的影響.pdf

1、目的：通過survivin反義寡核苷酸(Antisense Oligodeoxynucleotides,ASODN)轉染HSC-T6細胞株，研究其對HSC-T6細胞株凋亡的影響。
　　方法：實驗分為空白組、脂質體組、1000nmol/LSODN組、ASODN組(400nmol/L、800nmol/L、1000nmol/L)。脂質體介導survivin寡核苷酸轉染HSC-T6細胞24小時后,倒置熒光顯微鏡下觀察轉染效率。Surviv

2、in寡核苷酸轉染HSC-T6細胞48小時后，通過RT-PCR、western-blotting檢測survivin基因表達的改變,倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)的改變，PI單染流式細胞儀測定細胞凋亡率。
　　結果：轉染24小時后，于倒置熒光顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)：ODN各濃度組細胞內均可見到清晰的綠色熒光，轉染效率均達到80％；轉染作用48小時后,RT-PCR及werstern-blot結果顯示：與空白組、脂質體組、1000nmol/LSOD

3、N組比較，ASODN各濃度組survivin mRNA及蛋白表達量均低于各對照組（p<0.01）；ASODN各濃度組survivin mRNA及蛋白表達量組間比較，均有統(tǒng)計學意義（p<0.01），空白組、脂質體組、1000nmol/LSODN組組間比較無統(tǒng)計學差異（p>0.05）。在倒置顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)ASODN各濃度組細胞出現(xiàn)明顯的凋亡現(xiàn)象；PI單染流式細胞儀檢測顯示：與空白組、脂質體、1000nmol/LSODN組比較，ASODN各