動(dòng)脈中膜平滑肌細(xì)胞凋亡促進(jìn)受體骨髓細(xì)胞參與移植物動(dòng)脈硬化的研究.pdf

1、研究背景：
　　 慢性排斥反應(yīng)引起的移植物動(dòng)脈硬化是導(dǎo)致遠(yuǎn)期移植物功能喪失的主要因素。移植物動(dòng)脈硬化的主要病理特征是血管新生內(nèi)膜形成導(dǎo)致管腔狹窄及其引起的移植器官缺血性改變；而受體骨髓細(xì)胞遷移并分化為血管平滑肌細(xì)胞是移植物動(dòng)脈新生內(nèi)膜形成的主要細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ)。目前研究發(fā)現(xiàn)，移植物動(dòng)脈中膜平滑肌細(xì)胞凋亡是器官植入后的早期病理學(xué)改變，但是，其在移植物動(dòng)脈硬化中的作用機(jī)制至今尚不清楚。
　　 研究目的：
　　 探討移植物動(dòng)

2、脈中膜平滑肌細(xì)胞凋亡對(duì)受體骨髓細(xì)胞參與移植物動(dòng)脈硬化的作用機(jī)制。
　　 研究方法：
　　 制備性別錯(cuò)配嵌合體大鼠腹主動(dòng)脈移植模型，并體內(nèi)感染攜帶p53和Bcl-XL凋亡相關(guān)基因的慢病毒。移植術(shù)后2周和8周制備移植動(dòng)脈組織切片，免疫組化檢測(cè)靶基因p53和Bcl-XL的特異性表達(dá)，并檢測(cè)SDF-1α、TGF-β和PDGF-BB等細(xì)胞因子在移植血管壁的蛋白水平；TUNEL 染色定量分析移植動(dòng)脈中膜平滑肌細(xì)胞凋亡情況；病理組織學(xué)

3、分析檢測(cè)移植動(dòng)脈新生內(nèi)膜增生病變；并且，采用激光顯微切割技術(shù)，收集新生內(nèi)膜SMα-actin 陽(yáng)性細(xì)胞，用PCR分析探討移植動(dòng)脈新生內(nèi)膜平滑肌細(xì)胞的來(lái)源。
　　 研究結(jié)果：免疫組化顯示靶基因p53和Bcl-XL在移植動(dòng)脈壁特異性表達(dá)，且以移植動(dòng)脈中膜為主。病理組織學(xué)分析提示p53基因轉(zhuǎn)染特異性誘導(dǎo)移植動(dòng)脈中膜平滑肌細(xì)胞凋亡，引起血管壁SDF-1α和TGF-β表達(dá)明顯升高，并促進(jìn)移植動(dòng)脈新生內(nèi)膜形成及動(dòng)脈硬化；而B(niǎo)cl-XL基因轉(zhuǎn)

4、染顯著抑制中膜平滑肌細(xì)胞凋亡，下調(diào)SDF-1α和TGF-β表達(dá)水平，從而減少移植動(dòng)脈內(nèi)膜增生。PCR分析提示p53 轉(zhuǎn)染組新生內(nèi)膜細(xì)胞中的雄性來(lái)源細(xì)胞 (Sry mRNA 水平)較載體組顯著增多(P<0.01)，而B(niǎo)cl-XL組新生內(nèi)膜細(xì)胞中的雄性來(lái)源細(xì)胞較載體組顯著減少(P<0.01)。
　　 研究結(jié)論：
　　 移植動(dòng)脈中膜平滑肌細(xì)胞凋亡通過(guò)上調(diào)SDF-1α和TGF-β表達(dá)誘導(dǎo)受體外周血骨髓干細(xì)胞遷移至移植動(dòng)脈內(nèi)膜，并