陳化烤煙葉面優(yōu)勢菌種的篩選定位與增香效應(yīng)研究.pdf

1、本文以3個烤煙品種為試材，采用微生物學(xué)、酶學(xué)和分子生物學(xué)等技術(shù)和手段對不同陳化時期煙葉的酶活性和葉面細菌的動態(tài)變化進行了研究。采用PCR-DGGE技術(shù)對不同陳化階段煙葉表面的微生物進行了多樣性分析，對煙葉表面共有優(yōu)勢微生物菌株進行了鑒定，并利用平板分離技術(shù)分離得到煙葉表面可培養(yǎng)優(yōu)勢微生物；通過向烤煙煙葉表面噴施酶制劑和優(yōu)勢細菌微生物來研究酶和微生物對煙葉中揮發(fā)性香氣成分含量的影響，研究結(jié)果如下： 1.不同陳化時期烤煙煙葉中幾種酶

2、活性的動態(tài)變化。結(jié)果顯示，在不同陳化階段，煙葉中多酚氧化酶、過氧化物酶、淀粉酶、蛋白酶酶活性的變化規(guī)律基本一致，表現(xiàn)為在煙葉陳化初期，4種酶的酶活性呈現(xiàn)逐漸增加的趨勢，到陳化6個月或者9個月時酶活性達到最大值，之后酶活性逐漸降低。不同品種之間，陳化煙葉中4種酶活性的變化規(guī)律是一致的，表明陳化過程中酶活性變化與煙草基因型關(guān)系不大。 2.不同陳化時期烤煙煙葉表面優(yōu)勢細菌微生物的分離鑒定。采用PCR-DGGE技術(shù)對不同陳化時期煙葉表面

3、優(yōu)勢細菌微生物進行了分離鑒定，結(jié)果表明，在不同陳化時期，相同品種煙葉表面微生物的多樣性存在一定差異，隨著陳化時間的延長，煙葉表面的部分細菌微生物數(shù)量呈現(xiàn)增多趨勢，部分細菌微生物呈減少態(tài)勢，從總量來看，細菌微生物數(shù)量隨著陳化時間的延長逐漸降低，同一品種煙葉在不同陳化時期擁有較多共有的優(yōu)勢條帶；不同品種間條帶的差異程度較大，但不同品種煙葉表面也存在較多共有優(yōu)勢菌群，經(jīng)過測序分析，不同陳化時期不同品種煙葉表面上共有的優(yōu)勢菌種分別為Bacter

4、iovoraxsp.EPC3、Bacillusmegaterium、UnculturedSphingomonassp、Unculturedbacterium、Unculturedyard-trimming-compostbacteriumcloneS-12。同時采用平板分離方法對煙葉表面的可培養(yǎng)菌種進行了分離鑒定，結(jié)果表明，在煙葉表面存在的優(yōu)勢菌種均為芽孢桿菌，他們分別是巨大芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、蕈狀芽孢桿菌、凝結(jié)芽孢桿菌、堅強芽孢桿